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骨髓基质干细胞与不同支架材料复合异位成骨能力的实验研究
目的:研究骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)与不同支架材料复合后的异位成骨能力.方法:将体外诱导培养的成年犬骨髓基质干细胞,以1×106/cm2的密度接种到冻干骨基质(fdDBM)、磷酸三钙(TCP)、孔径分别为200靘及500靘的珊瑚羟磷灰石(CH200、CH500)等支架材料上,分别于体外培养的第4~7天进行扫描电镜及石蜡切片HE染色,了解细胞在不同支架上的黏附及生长情况,并于1周后将大小为10mm×5mm×2mm的上述细胞支架复合物(fdDBM、TCP、CH200、CH500)分别植入裸鼠(n=8)背部皮下,每只裸鼠均植入4个实验组及1组无细胞的fdDBM空白支架对照组.9周后,取材行石蜡切片及HE染色,以IMAGER-PRO PLUS软件测量每组的新生骨小梁量,并采用SAS软件包行单因素方差分析.结果:犬BMSCs与4种支架材料均黏附良好,TCP、CH200及CH500 3组各样本均能观察到新骨形成,fdDBM及fdDBM空白对照组分别有75%、25%的样本有新骨形成;其中,TCP组的TBV值(28.2%±2.86%)显著高于CH200组(24.1%±4.12%)及CH500组(18.1%±4.66%)(P<0.01).结论:BMSCs与4种材料的相容性良好.TCP与BMSCs复合后异位成骨效果显著,是很有希望的骨组织工程支架材料.
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骨髓基质干细胞与冻干脱矿骨基质材料体外附着的实验研究
目的:研究骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)经诱导、扩增后与冻干脱矿骨基质(freeze-dried demineralized bone matrix, fdDBM)的相容性及体外附着规律,为进一步体内回植提供研究基础.方法:抽取成年犬骨髓,用全骨髓培养法获取单核细胞,经条件培养液体外诱导、扩增后,以不同浓度接种于制备的fdDBM上,通过倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞与材料的附着情况并以MTT实验了解适宜的接种浓度.结果:当接种密度为1.0×106/cm2时,细胞与支架材料之间有大附着量.结论:BMSCs能在fdDBM上粘附并生长,相容性良好,是理想的骨组织工程支架材料.