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透明质酸合成酶1在脑出血后脑组织透明质酸含量及相对分子质量变化过程中的作用
目的 观察透明质酸合成酶1(HAS1)在脑出血后脑内透明质酸(HA)含量和相对分子质量变化过程中的作用.方法 采用自体血注射法制作HAS1基因敲除小鼠和野生型C57BL/6J小鼠脑出血模型.分别分为出血后24 h组、出血后72 h组和对照组(不注自体血,余同),每组均n=6.提取出血侧半球脑组织的HA,经凝胶层析分离后用ELISA方法检测HA的总量和相对分子质量分布.Real time PCR方法观察HASl、HAS2、HAS3和透明质酸分解酶(Hyal) mRNA表达水平的变化.通过对野生型C57BL/6J小鼠和HAS1基因敲除小鼠的比较,评价HASl在此过程中的作用.结果 脑出血后,①野生型C57BL/6J小鼠脑HA含量基本不变,仅在出血后72 h组呈轻微下降,但HA相对分子质量分布有显著变化,出血后24 h组呈现一过性的大分子HA的比例增加.②HAS1基因敲除小鼠脑内HA总量比野生型C57BL/6J小鼠减少1/4.出血后72 h组的HA总量明显下降,而且出血后24 h组的大分子HA比例不升反降,至出血后72 h后也未见恢复.③出血后,基因表达均随时间而增加,增幅大小顺序为HAS2> HAS3> HAS1,Hyal1 >Hyal3>Hyal2.野生型C57BL/6J和HAS1基因敲除小鼠间只有HAS3的表达有差异.结论 HAS1基因敲除导致脑内HA总量减少1/4,脑出血后24 h HAS3基因表达代偿性增加,导致脑出血后脑内大分子HA含量下降.