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胰腺癌细胞PANC-1中LSD1负向调控抑癌基因SIRT3的实验研究
背景与目的：组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1，LSD1)是重要的染色质修饰蛋白之一，可以通过调节染色质的结构调节基因的转录调控，进而影响肿瘤的发生、发展、侵袭、转移以及代谢异常等恶性潜能，是判断肿瘤预后的生物标志物。Sirtuins家族去乙酰化酶3(sirtuin3，SIRT3)基因是位于线粒体内的抑癌基因，通过调控肿瘤代谢异常以及氧化损伤行使抑癌基因的功能。本研究通过基因转录调控的手段，研究胰腺癌细胞PANC-1中LSD1与SIRT3的关系。方法：通过RNA干扰(RAN interference， RNAi)、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation，CoIP)、染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay，ChIP)及启动子活性分析等分子生物学实验手段，探讨LSD1与SIRT3在PANC-1细胞中的关系。结果：通过RNAi的手段干扰LSD1的表达，发现SIRT3基因转录水平和蛋白水平明显上升；通过蛋白相互作用的手段，发现LSD1可以与SIRT3转录调控的重要转录因子过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,coactivator 1 alpha，PGC-1α)相互作用；通过ChIP方法，发现LSD1与PGC-1α共同募集到SIRT3基因的启动子区域染色质上；通过启动子活性分析，发现LSD1基因可以显著抑制PGC-1α对SIRT3基因的转录调控。结论：LSD1可以表观遗传调控抑癌基因SIRT3的转录，为深入研究LSD1与肿瘤代谢异常以及氧化应激提供了理论依据。
