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PERV文献资料
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超高压脱细胞组织工程血管支架的实验研究
目的 采用新的更安全的抗原去除技术-超高压脱细胞方法处理同种异体血管,观察该方法的脱细胞效果以及猪内源性逆转录病毒(PERV)的去除情况.方法 无菌条件下取出猪降主动脉血管,用10 000 atm超高静水压(4 ℃冷方压)将供体来源细胞压碎,结合酶的消化作用,PBS的搅拌洗涤,脱去细胞残片形成血管生物支架.对该支架脱细胞效果进行组织学评估、超微结构观察、检测DNA含量同时检测PERV.结果 组织学显示超高压脱细胞方法可完全除去血管支架内的供体细胞成分,经超高压脱细胞处理后DNA含量显著降低(p＜0.0001)、PERV被成功灭活.结论 超高压脱细胞方法可为我们提供更安全可靠的组织工程血管支架.
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PERV的整合对HEK293细胞中HERV-W mRNA表达的影响
目的 明确PERV的整合是否影响HEK293细胞中HERV-W各基因表达水平.方法 根据GenBank中登录的基因序列,分别设计HERV-W gag、HERV-W pol、HERV-W env、syncytin-1和humanβ-actin引物,并分别建立SYBRGreen I荧光定量PCR检测方法,用于检测HEK293、HEK293-PERV中各基因mRNA的表达.结果 本研究建立的检测方法均具有良好的特异性、敏感性和稳定性,标准曲线的相关系数大于0.99,扩增效率介于95％～110％,可用于检测.结论 检测结果经2-△△o分析后,发现与对照相比,PERV整合后的HEK293-PERV中HERV-W gag、HERV-W pol、HERV-W env和syncytin-1 mRNA相对表达量分别升高37.08倍、42.56倍、2.49倍和13.17倍,为进一步明确PERV在异种移植中的安全性提供参考.
