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富组蛋白II文献资料
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恶性疟原虫富组蛋白Ⅱ全编码区基因的真核克隆及表达
目的 探讨恶性疟原虫富组蛋白Ⅱ(Histidine-rich proteinⅡ,HRPⅡ)基因在真核细胞中的表达.方法 应用聚合酶链反应(PCR)扩增HRP II全编码区基因,经HindⅢ和Barn HI双酶切后定向克隆入带CMV启动子的真核高效表达载体pcDNA3,构建HRP II/pcDNA3重组载体;用脂质体法将重组载体转染HepG2肝癌细胞,经G418加压筛选后,收集阳性克隆细胞培养上清,表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析.结果 成功构建HRP II/pcDNA3真核表达载体,SDS-PAGE和Western免疫印迹分析表明,HRPⅡ表达产物相对分子质量约35 000,呈分泌性表达,且表达产物能被抗HRP II单克隆抗体特异识别.结论 恶性疟原虫HRPⅡ全编码区基因在肝癌细胞HepG2中获得成功表达.
