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22.6 kDa抗原文献资料
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日本血吸虫22.6 kDa抗原T细胞表位的重组、表达及初步鉴定
目的鉴定日本血吸虫中国大陆株22.6 kDa抗原(Sj22.6)的T细胞表位.方法用计算机软件预测Sj22.6分子的T细胞表位,设计并合成其编码核苷酸,定向克隆入融合表达载体pET-32c(+),转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经酶切及测序鉴定出重组克隆.阳性克隆经IPTG诱导表达,表达产物用NTA柱纯化.用纯化后的表位肽融合蛋白体外刺激C3H小鼠脾单个核细胞,3H-TdR掺入法检测其增殖.结果用计算机软件预测获得Sj22.6抗原的4个候选表位肽,并成功克隆入pET-32c(+).其重组体均可表达分子量约20 kDa的融合蛋白,用NTA柱纯化后经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示单一条带.其中P4、P5、P6融合蛋白能有效刺激小鼠脾单个核细胞增殖.结论从Sj22.6抗原中初步鉴定出P4、P5、P6 3个T细胞表位.
关键词： 日本血吸虫 22.6 kDa抗原 T细胞表位 鉴定
