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液相色谱－串联质谱法测定尿酸及与常规检测方法的比较
目的：建立液相色谱－串联质谱（LC－MS／MS）检测血清尿酸的方法，并与临床常规生化方法进行比较，为临床实验室不同检测系统尿酸检测结果的一致性提供参考。方法血清添加同位素内标尿酸－15 N2，经乙腈处理吹干重组后采用 LC－MS／MS 测定。以 Capcell C18 MGⅢ为分析柱进行反相色谱分离，以5 mmol／L 乙酸铵＋0．1％乙酸水溶液和甲醇（90∶10，v／v）为流动相，等度洗脱，流速0．3 mL／min，电喷雾离子化串联四极杆质谱，负离子多反应监测，尿酸离子通道为167／124 amu（定量）、167／96 amu（定性）；尿酸－15 N2离子通道为169／125 amu。LC－MS／MS 进行方法学评价后与临床尿酸常规检测方法（酶紫外法和酶比色法）进行比较。结果 LC－MS／MS 检测尿酸的线性范围为30～952μmol／L，批内和批间精密度分别为2．01％～6．23％和4．55％～8．08％，准确度为96．5％～103．4％。尿酸的色谱保留时间为1．5 min，单份样品的分析时间为3 min。酶紫外法、酶比色法与LC－MS／MS 的平均偏差分别为－10．02％、－9．88％；线性相关方程分别为 Y酶紫外法＝0．898XLC－MS／MS ＋2．15，r ＝0．978；Y酶比色法＝0．845XLC－MS／MS ＋22．15，r ＝0．983。 LC－MS／MS 与美国标准技术研究所（NIST）定值参考物质的平均偏差为1．56％±0．65％，与卫生部临床检验中心2014年代谢物正确度验证样品的定值的偏差为－0．34％～3．05％。结论采用 LC－MS／MS 可简便、准确地定量检测尿酸。酶紫外法、酶比色法的血清尿酸测定结果与LC－MS／MS 具有较好的可比性。
关键词： 尿酸 液相色谱-串联质谱法 尿酸酶紫外法 尿酸酶比色法
