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IgG抗体成分文献资料
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重组寻常型天疱疮抗原抗血清的制备与纯化
寻常型天疱疮抗原(pemphigus vulgaris antigen,PVA)是桥粒中相对分子质量为130 000的糖蛋白,其分子由细胞外区(extracellular domain,EC)、跨膜区和细胞内区三部分组成,主要发挥作用的区域在细胞外区.为了了解PVA细胞外区的致病性位点及其相应抗体的致病作用,制备抗血清是必需环节.本文在已重组表达的PVA EC1-2融合蛋白的基础上进行蛋白纯化,并免疫家兔,使之产生针对融合蛋白的特异性抗血清,经双向免疫扩散实验,其效价为1:16～1:32.采用辛酸沉淀法和DEAE-52-纤维素阴离子交换层析进行抗血清IgG抗体成分的提纯,总量为125～220 mg,经间接免疫荧光检测,其滴度为1:40.从而获得高滴度、高特异性的兔抗PVA EC1-2融合蛋白抗血清IgG抗体成分.
