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引物CHS1文献资料
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一步法快速鉴定皮肤癣菌
目的 探讨一步法快速鉴定皮肤癣菌的临床价值.方法 采用快速简便的一步法处理癣菌及非癣菌菌株获得菌株DNA.癣菌通用引物的敏感性测定:将获得的菌株DNA以及人DNA进行PCR扩增后跑电泳,观察是否出现特定大小的阳性条带.PCR反应体系的敏感性测定:用超微量分光光度计测量癣菌菌液的DNA浓度,再将癣菌菌液的DNA进行10倍连续稀释,获得不同浓度的癣菌菌液,随后进行PCR扩增,记录特定大小的阳性条带出现时的小癣菌DNA浓度值,PCR重复做3次.结果 所有癣菌菌株经PCR扩增后均出现366 bp的阳性条带,非癣菌菌株及人DNA经PCR扩增后均未出现任何条带.将浓度为600 ng/μl的癣菌DNA浓度经10倍连续稀释后,得到的7个浓度菌液,其中600 ng～6 pg经PCR扩增后出现366 bp的阳性条带,第7个600 fs浓度经PCR扩增后未出现任何条带.结论 皮肤癣菌通用引物CHS1具有较高的特异性,可用作检测癣菌的特异性引物,本实验PCR体系的敏感度较高,为6 pg.
