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载TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体的制备及其相关性质
目的:制备载pAFP-TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体并探讨其相关特性.方法:用化学共沉淀法制各PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体,将pAFP-TK自杀基因表达质粒包裹,形成载TK基因的PEG-PEIFe3O4纳米磁流体.结果:粒径分析仪及原子力显微镜检测载TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体平均粒径202.6 nm,分布均匀,无黏附团聚.琼脂糖凝胶电泳分析PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体与DNA比例达10:1时,结合率高,达93.56%.PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体中的DNA在37℃、DNasel及血清存在下消化数小时后,仍然保持结构的完整.结论:载pAFP-TK基因表达质粒的PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体与DNA有较高的结合率,可以有效地保护质粒DNA等特性.
关键词: PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体 甲胎蛋白启动子 自杀基因 转染 -
载TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体体外肿瘤细胞抑制的研究
目的:研究载TK基因PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体体外肿瘤细胞抑制特性.方法:以RT-PCR方法鉴定其在各细胞系中mRNA水平上的表达状况.采用MTT法研究载TK基因纳米颗粒体外抑制肿瘤细胞的生长作用.结果:PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体能有效的转染pAFP-TK进入AFP阳性的HepG2细胞,并在细胞内得以正常表达.MTT法显示,AFP阳性的细胞在转染pAFP-TK后对GCV的敏感性大大提高,细胞存活率明显下降.结论:PEG-PEI Fe3O4纳米磁流体能高效转染pAFP-TK质粒进入细胞,并在AFP阳性肝癌细胞中获得特异性表达,加用GCV后,还可高效杀伤AFP阳性肝癌细胞.