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  • 大鼠心脏kir2.2、kir2.3通道重组质粒构建及真核表达

    作者:张莉;秦桂秀;张新华;刘克战;吴博威;刘清华;焦咪;范辰辰;宋瑞瑞

    目的 构建大鼠心脏kir2.2、kir2.3通道真核表达质粒,并鉴定其在人胚胎肾细胞(HEK293)中的表达.方法 提取大鼠心脏组织细胞RNA,逆转录扩增kir2.2、kir2.3通道编码基因,克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,构建重组质粒并转染HEK293细胞,应用全细胞膜片钳法定kir2.2、kir2.3通道电流.结果 重组质粒pEGFP-N1-kir2.2及pEGFP-N1-kir2.3经双酶切和测序证实构建正确,并在HEK293细胞中成功表达,且记录到相应通道电流.结论 成功构建了大鼠心脏kir2.2、kir2.3通道真核表达质粒,并在HEK293细胞中成功表达.

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