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高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞损伤及机制的研究

邓茜;孙惠力;曾又佳;徐华;龚永慧;李顺民

摘要: 目的:观察高糖诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2)损伤及机制.方法:细胞生长融合至约80%时,用DMEM低糖培养基无血清同步化48 h,然后分为以下7组.①正常糖对照组(5.5 mM低糖DMEM培养基,NG);②高糖1组(15mM高糖DMEM培养基,HG1);③高糖2组(30 mM高糖DMEM培养基,HG2);④高糖3组(45 mM高糖DMEM培养基,HG3);⑤高糖4组(60 mM高糖DMEM培养基,HG4);⑥等渗1组(30 mM甘露醇DMEM培养基,HM1);⑦等渗2组(45 mM甘露醇DMEM培养基,HM2).观察不同糖浓度(5.5~45 mM)刺激HK-2细胞24 h,观察IκBα和p65蛋白表达规律.MTT比色法检测细胞活力.Western blot法检测IκBα和p65蛋白表达.结果:高糖2组、高糖3组、高糖4组浓度呈依赖性对HK-2活力存在显著的抑制作用(P< 0.05,P<0.01);高糖2组、高糖3组浓度的甘露醇对HK-2活力没有明显的抑制作用(P>0.05).IκBα蛋白表达随着葡萄糖浓度的升高而依次降低,而p65蛋白表达呈浓度依赖性升高,高糖2组、高糖3组的葡萄糖与正常糖对照组比较,差异有显著性或非常显著性意义(P< 0.05,P<0.01).结论:高糖诱导的HK-2毒性损伤呈一定的浓度依赖关系,其机制与NF-κB通路的激活有关,与渗透压作用无明显关联.

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