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miR-23b过表达对高糖诱导近端肾小管上皮细胞EMT及PI3K-AKT通路的影响
目的 研究过表达miR-23b对高糖诱导近端肾小管上皮细胞间充质转化(EMT)及PI3K-AKT通路的影响.方法 将人近端肾小管上皮细胞HK-2分为4组:正常葡萄糖(NG)组、高糖(HG)组、miR-23b阴性对照(NC)组和miR-23b过表达(mimic)组,转染48 h后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-23bmRNA的表达,光学显微镜观察细胞形态,qRT-PCR检测波形蛋白(VIM)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-CD)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(WB)检测VIM、α-SMA、E-CD、PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达.结果 与NG组比较,HG组中miR-23b表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-23b mimic后,HK-2细胞中miR-23b表达显著上调(P<0.05).与NG组比较,HG组、NC组和mimic组HK-2细胞出现大量纺锤形细胞,细胞中VIM、α-SMA mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.05),E-CDmRNA和蛋白表达显著下调(P<0.05),PTEN蛋白表达上调(P<0.05),PI3K、p-Akt蛋白表达下调(P<0.05);与HG组、NC组比较,mimic组HK-2细胞纺锤形细胞数量明显减少,细胞中VIM、α-SMA mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),E-CD、PI3K mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),PTEN蛋白表达下调(P<0.05),PI3K、p-Akt蛋白表达上调(P<0.05).结论 过表达miR-23b抑制高糖诱导近端肾小管上皮细胞间充质转化作用,其机制可能与抑制PI3K-AKT通路激活有关.
