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人脐带间充质干细胞条件培养液对Aβ损伤原代海马神经元凋亡的影响
目的 探讨人脐带间充质干细胞条件培养液(human umbilical cord mesenchymal stem cells conditioned medium,hUCMSCsCM)对体外培养的Aβ(Amyloid β,β-样淀粉蛋白)损伤海马神经元凋亡的影响.方法 分离、培养人脐带间充质干细胞,第3~4代的细胞用于收集条件培养液;分离、培养大鼠海马神经元,培养7~8d的神经元用于实验分为hUCMSCsCM对神经元细胞活力的影响:分为溶剂对照组、Aβ损伤组、Aβ+hUCMSCsCM低剂量组、Aβ+hUCMSCsCM中剂量组、Aβ+hUCMSCsCM高剂量组.通过MTT检测神经元活力;通过DAPI染色观察5组神经元凋亡情况;通过Western Blot分析神经元cyt-c蛋白水平.结果 与溶剂对照组相比,Aβ可降低体外培养的原代海马神经元细胞活力,作用呈浓度、时间依赖性(P<0.05);与Aβ损伤组相比,hUCMSCsCM可对抗Aβ引起的细胞活力下降(P<0.05).与溶剂对照组相比,Aβ(终浓度10 μmol/L)处理12 h显著增加体外培养的原代海马神经元细胞凋亡;与Aβ损伤组相比,hUCMSCsCM可减少 Aβ诱导的神经元凋亡,抑制 Aβ 引起的 cyt-c 释放,作用呈浓度依赖性(P <0.05).结论 人脐带间充质干细胞条件培养液可抑制Aβ引起的原代培养海马神经元凋亡,发挥神经保护作用,其机制可能与抑制cyt-c释放有关.
关键词： 人脐带间充质干细胞条件培养液 神经元 凋亡 β-样淀粉蛋白 -
脐带间充质干细胞通过上调神经营养因子表达改善 Aβ损伤大鼠的学习记忆能力
目的：观察人脐带间充质干细胞（ human umbilical cord mesenchymal stem cells ， hUCMSCs ）对β-样淀粉蛋白（ amyloid β，Aβ）损伤大鼠学习记忆能力的影响，并探讨神经营养因子（neurotrophin，NT）在hUCMSCs改善大鼠学习记忆能力中的作用。方法实验分5组，分别为：空白对照组（control，con）、Aβ溶剂对照组（v-con）、人脐带间充质干细胞对照组（hUCMSCs-con）、Aβ损伤组（injury），以及人脐带间充质干细胞治疗组（ hUCMSCs ）。双侧海马CA1区定位注射Aβ制备阿尔茨海默样学习记忆障碍大鼠模型；通过Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力；通过硫堇尼氏体染色观察海马CA1区细胞区形态；通过ELISA分析神经营养因子含量。结果侧脑室注射脐带间充质干细胞可改善Aβ损伤大鼠的空间学习记忆能力，对抗Aβ损伤大鼠海马CA1区锥体细胞损伤，增加Aβ损伤大鼠海马组织神经营养因子表达。结论脐带间充质干细胞可对抗Aβ的神经毒性作用，改善Aβ损伤大鼠的空间学习记忆能力，其神经保护作用与增加海马组织中神经营养因子表达有关。
