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卵母细胞孤雌激活及纺锤体形态改变?
目的：：探讨不同激活方法小鼠卵母细胞孤雌激活的效率及纺锤体的变化。方法：小鼠卵母细胞采用乙醇、氯化锶化学激活，研究孤雌激活效果；采用免疫荧光染色法观察孤雌激活下卵母细胞纺锤体的动态变化。结果：(1)8%乙醇处理10、15 min的桑囊率高于处理5 min；(2)10 mmol·L-1氯化锶激活率高于2.5、5 mmol·L-1；(3)激活过程中纺锤体形态发生了改变。结论：8%乙醇处理时间相对延长有利于提高桑囊率；高浓度氯化锶激活效果较好；孤雌激活后纺锤体形态会发生改变。
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兔卵母细胞的超数排卵与孤雌激活
目的:探索兔卵母细胞的佳超排方法及孤雌激活的条件,为人-兔异种核移植提供充足的兔卵母细胞. 方法:采用不同剂量的垂体促卵泡素(FSH)对青年兔和经产兔进行超数排卵,获得兔卵母细胞后,以不同强度的直流电脉冲对兔卵母细胞进行孤雌激活. 结果:在排卵总数方面,3个激素组均高于对照组(P＜0.05),且FSH 25 U激素组(31.80±3.27)与FSH 80 U+聚乙烯吡咯酮(PVP)激素组(31.83±3.06)均高于FSH 15 U激素组(15.00±1.58),经产兔优于青年兔(P<0.05);在200 V/mm组孤雌激活兔卵母细胞的卵裂率(85.59%)和4～8细胞期发育率(21.19%)高,与240 V/mm组(71.43%, 10.48%)之间存在统计学差异(P＜0.05). 结论:FSH 25 U及FSH 80 U+PVP方案均能产生佳超排效果,经产兔优于青年兔;电场强度200 V/mm,脉宽40 μs,2次脉冲、间隔1 s为兔成熟卵母细胞的较理想的激活条件.
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氯化锶不同浓度及作用时间对小鼠孤雌胚类原核数量的影响
目的:探讨不同浓度及作用时间的氯化锶(SrCl2)对小鼠卵母细胞孤雌激活胚胎中出现类原核数量及发育潜能的影响,建立能模拟精子效应的小鼠孤雌的激活体系.方法:分别用5 mmol/L、10 mmol/L、15 mmol/L、20 mmol/L浓度的SrCl2激活小鼠卵母细胞,观察激活胚的类原核数量及发育潜能,然后在佳刺激浓度的SrCl2的激活液中分别处理4h、6h、8h,观察类原核数目及形态,分析SrCl2浓度对小鼠卵母细胞激活效果的影响.结果:hCG注射后18h取小鼠卵母细胞,在10 mmol/L SrCl2浓度下激活6h,出现双原核(2PN)百分比显著高于其它浓度SrCl2处理组(P＜0.01),且与小鼠体外受精6h后的2PN率及囊胚形成率无统计学差异(P＞0.05).结论:10 mmol/L SrCl2条件下激活小鼠卵子6h产生的孤雌胚胎中出现2PN率及发育潜能高,提示10 mmol/L SrCl2激活处理6h可以模拟精子对卵子的激活条件.
关键词： 氯化锶(SrCl2) 卵母细胞 孤雌激活 类原核 发育潜能 -
5-氮杂胞苷对小鼠体外培养胚胎组蛋白H3K27乙酰化模式的影响
目的:探讨5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-AzaC)对胚胎体外发育过程中异常表观修饰的修正作用.方法:取小鼠体内自然受精原核胚和孤雌激活原核胚分别用不同浓度的5-AzaC(0.1 μmol/L、0.01 μmol/L、空白对照)处理24 h后在体外进行培养,然后采用间接免疫荧光法检测分析不同发育时期的胚胎组蛋白H3K27乙酰化模式.结果:5-AzaC对体内受精的2-细胞期和4-细胞期胚胎的组蛋白H3K27乙酰化模式有比较明显的影响,较低浓度的5-AzaC能使胚胎体外发育率有所提高,但差异无统计学意义(P＞0.05); 5-AzaC对孤雌激活囊胚组蛋白H3K27异常的乙酰化模式有明显影响,但是不同浓度之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:5-AzaC可能通过修正胚胎异常的H3K27乙酰化模式而提高孤雌胚的体外发育及着床能力,在改善胚胎的体外培养条件方面具有潜在的应用前景.
关键词： 孤雌激活 5-氮杂胞苷(5-AzaC) H3K27乙酰化 胚胎发育
