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3种小胶质细胞培养方法的比较
目的:建立一种小鼠小胶质细胞的简便高产量的原代培养方法.方法:在常规的神经胶质混合培养后,分别采用McCarthy-Gulian法、营养丧失法、营养丧失+温和消化法三种方法进行小胶质细胞的分离纯化,通过细胞计数来了解比较培养细胞的产量,针对细胞表面的小胶质细胞的标志性抗原MAC-1进行免疫组织化学染色,观察细胞形态和激活状态,计算培养细胞纯度.结果:营养丧失十温和消化法细胞产量高,三种方法的细胞培养形态、激活状态、纯度没有显著差异.结论:营养丧失和胰酶一EDTA温和消化均较经典的McCarthy-Gulian法产量高,2种方法结合起来的营养丧失+温和消化法是一种新的简便易行高产量的小胶质细胞培养方法.
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一种高产量的小胶质细胞培养及其鉴定方法
目的建立一种简易高产量的原代小胶质细胞体外纯化培养方法.方法在小胶质细胞原代培养过程中以McCarthy等的经典培养方法为基础,通过提高初次接种密度,减少细胞离心过滤过程,进行不换液的营养缺失培养等重要改进,并使用低浓度胰酶-EDTA消化法分离纯化小胶质细胞,使用MAC-1抗体免疫化学染色标记.结果取得了高纯度和高产量的小胶质细胞.结论小胶质细胞培养过程中联合使用营养缺失法和低浓度胰酶-EDTA消化法分离纯化可有效提高培养产量.
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聚乙二醇和胰蛋白酶用于猪动脉管道去细胞效果比较
目的 比较0.05%胰蛋白酶-EDTA脱细胞方法与聚乙二醇(poly ethylene glycol,PEG)脱细胞方法对组织物理特性的影响和脱细胞程度.方法 用聚乙二醇和胰酶-EDTA处理猪大动脉动脉管道.结果 PEG组去细胞百分率为95.32%,胰酶-EDTA组去细胞百分率为90.35%,两组比较P《0.05,PEG组细胞外基质(ECM)结构保存完整;与对照组比较差异无统计学意义(P》0.05).结论 PEG法处理动脉管道较传统的组织工程去细胞更为有效,优越性明显,细胞外基质保存完整,生物力学特性稳定.
