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兔肺动脉内皮细胞文献资料
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肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞的影响
目的:观察肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞(RPAECs)DNA合成、损伤、一氧化氮(NO)合成、内皮素(ET)分泌的影响.方法:用胶原酶Ⅰ消化分离获得兔肺动脉内皮细胞,在含不同浓度肺心病患者或正常人血清的培养基孵育12 h,应用MTT比色法检测细胞增殖情况;应用单细胞电泳法检测细胞DNA的损伤;通过检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、ET、NO等指标观察RPAECs分泌功能的变化.结果:高浓度肺心病患者血清对RPAECs细胞增殖有明显抑制作用,其中部分细胞脱落死亡;肺心病患者血清浓度为10％、15％、20％时LDH释放量显著高于正常对照组;随着肺心病患者血清浓度的升高,NO较正常对照合成量下降,而ET分泌量显著升高,且两者有显著相关性.结论:高浓度肺心病患者血清对RPAECs有毒性作用,损伤DNA,且抑制DNA合成.
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兔肺动脉内皮细胞DNA损伤检测方法的建立及初步应用
[目的]建立兔肺动脉内皮细胞单细胞电泳方法检测DNA的损伤并初步观察肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞DNA的损伤作用.[方法]用胶原酶Ⅰ消化分离获得兔肺动脉内皮细胞(RPAECs),将血管内皮细胞与含不同浓度肺心病患者和正常人血清的培养基共同孵育12h,收集细胞利用溶解液破坏细胞膜,再用高盐溶液将细胞DNA解链,然后对其进行琼脂糖凝胶电泳(AGE).电泳后经溴乙啶染色并在荧光显微镜下观察彗星样的电泳形状,判断细胞DNA的损伤程度.[结果]高浓度的肺心病患者血清作用后的内皮细胞,可见彗星样电泳形状.[结论]高浓度肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞的DNA有损伤.
