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一种可用于肿瘤实验模型的半无壳鸡胚培养技术
目的:建立一种可以用于肿瘤体内研究的大样本模型.方法:将瘤细胞接种于10 d龄的鸡胚尿囊膜上,重新封闭后7 d取材.结果:90.9%的尿囊膜上出现明显的肿瘤.结论:该方法可用于肿瘤体内实验的大样本研究,为肿瘤及其微循环研究提供了简便、经济的模型.
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骨髓液促进鸡胚绒毛尿囊膜血管的生成
背景:生长因子能促进侧支血管的发育,且多种因子协同效果更为明显,骨髓液中富含多种生长因子.目的:观察血管内膜损伤后的骨髓液对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用.方法:受精蛋70枚在(37.5±0.5) ℃条件下孵育,第7天开窗,第8天将存活鸡胚随机分为生理盐水组、正常血清组、正常骨髓液组、损伤血清组、损伤骨髓液组以及血管内皮生成因子组,每组10枚,分别滴加5 μL兔正常血清、5 μL兔骨髓液、5 μL兔血管内膜损害血清、5 μL兔血管内膜损害骨髓液、5 μL生理盐水及0.3 μg 血管内皮生长因子进鸡胚绒毛尿囊膜中,连续3 d.数码相机拍照后平铺于载玻片上,计数鸡胚绒毛尿囊膜新生的血管数目.结果与结论:与正常血清组相比,正常骨髓液组、血管内膜损害血清组鸡胚绒毛尿囊膜新生的血管总数明显增多,大中血管明显增生;且血管内膜损害血清组大、中血管数更为明显增加.提示正常骨髓液具有明显的促进鸡胚绒毛尿囊膜模型血管生成的作用,其强度优于血管内皮生长因子;血管内膜损伤第7天的血清和骨髓液能够明显的促进鸡胚绒毛尿囊膜上的血管生成,其强度优于血管内皮生长因子组.
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鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石血管化模型的建立
背景:利用第8-12天尿囊膜血管的快速生长期,可模拟骨缺损患者骨断端血管生长和植骨代替材料进入人体后的血管植入过程.目的:将羟基磷灰石负载于鸡胚尿囊膜模型,建立植入体血管化的研究模型.方法:将12枚罗曼品系鸡蛋于相同适宜条件下孵化至第8天,开窗后随机分为2组,实验组植入羟基磷灰石材料,建立鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型;对照组放入滤纸材料,密封后移入恒温恒湿箱内继续孵化.待孵化至第12天后,观察两组标本尿囊膜4级以上血管生成长度及单位面积血管生成长度,以及羟基磷灰石及滤纸材料上的血管新生状况.结果与结论:①待孵化12 d后,实验组标本平均尿囊膜血管新生成长度为24.031 mm,平均单位面积血管新生成长度为0.242 mm/mm2;对照组标本平均尿囊膜血管新生成长度为23.561 mm,平均单位面积血管新生成长度为0.212 mm/mm2,组间血管新生成长度及平均尿囊膜血管新生成长度比较差异无显著性意义;②实验组羟基磷灰石材料切片标本有明显类血管组织;③结果表明,鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型的建立对理想植骨材料及改变血管生成药物的研究提供了简单准确且高效的体外动物模型,且外载羟基磷灰石对尿囊膜上血管生成无影响.
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用鸡胚尿囊膜血管检测内皮抑素活性方法的建立
内皮抑素(endostantin)是目前世界上公认的活性强的血管生成抑制剂,有望用于肿瘤、血管瘤、视网膜增生等血管生成异常性疾病的治疗.本室已成功构建在大肠杆菌内高效表达的内皮抑素基因工程菌.为了检测重组内皮抑素的生物活性,我们对病毒学中常用的鸡胚接种方法加以改进,建立了用鸡胚尿囊膜血管检测内皮抑素活性的方法,获得满意的效果.现报告如下.
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转人内皮抑素基因双歧杆菌液抑制血管生长的实验观察
目的:研究转人内皮抑素基因双歧杆菌液对血管生长的抑制作用,并观察其对动物移植性肝癌Heps的抑瘤作用.方法:以小鼠移植性肝癌Heps建立肿瘤模型;分别进行灌胃和尾静脉注射给药,同时用转人内皮抑素基因双歧杆菌液做鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验,在解剖显微镜下计数血管条数,用图像分析仪定量分析血管密度.实验动物处死后,称瘤重并计算抑瘤率.结果:转基因双歧杆菌液高、中、低3个剂量组的抑瘤率分别为49.78%、45.81%和30.41%;普通双歧杆菌组抑瘤率为10.9%,尾静脉注射转基因双歧杆菌组抑瘤率为58.3%;CAM实验显示转基因双歧杆菌液可明显抑制血管的生成.结论:转基因双歧杆菌有良好的抑制血管生长和抑制肿瘤生长的作用,且其作用有量效关系.
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鸡胚尿囊膜血管生长的特点及观测方法
研究鸡胚尿囊膜血管的特点以及观测方法.培养海兰种种蛋,观测不同培养天数以及模拟用药后鸡胚尿囊膜血管数量、血管面积的变化.结果表明,鸡胚尿囊膜血管数量、血管面积随培养天数的增加而增加,生存能力亦随之增强.培养5d的鸡胚适于局部用药观测血管生长的研究.
