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豚鼠球囊毛细胞的分离及钾离子流的研究
目的:研究前庭毛细胞的细胞活性及膜上钾通道的类型.方法:用酶消化后机械法分离豚鼠球囊毛细胞,并用全细胞膜片钳技术观察豚鼠球囊Ⅱ型毛细胞侧膜上的钾通道电流.结果:①胶原酶Ⅳ浓度为0.35 mg/ml时,分离的毛细胞数量多,存活时间长;②当钳制电位为-100 mV,以10 mV的步距,从-70 mV至+20 mV阶跃,随着膜电位的去极化,可记录到一系列快速、瞬时的以A型钾通道为主的外向电流,4-Ap对其有特异性阻断作用.激活电压为-60～-50 mV;③当钳制电位为-70 mV,以10 mV的步距阶跃去极化(-50 mV～+40 mV),可产生一系列延迟整流性钾离子流,TEA能使该电流幅度下降53.3 %±6.0%.结论:分离豚鼠球囊毛细胞酶的佳浓度为0.35 mg/ml,Ⅱ型毛细胞膜上有A型钾通道和延迟整流性钾通道.
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腺苷引起促黑素细胞膜电位超极化的离子机制
通过对青蛙垂体中叶促黑素细胞的实验已发现,腺苷激活A1型腺苷受体后可引起细胞膜的超极化同时停止自发性动作电位的发放,但此现象所涉及的离子机制尚不清楚.本实验采用膜片箝技术的全细胞电流、电压记录和细胞吸附单通道电流记录方法,对此电流进行了探讨.实验结果表明:腺苷所致的细胞膜超极化是由于增加了非电压激活的钾离子通道的开放,而对超极化电压激活的内向阳离子电流(Ih)没有影响.
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氟哌啶醇和R(-)-NPA抑制C6神经胶质瘤细胞的钾电流
本工作用全细胞膜片箝记录的方法,观察了氟哌啶醇(haloperidol,以下简称HALO)和R(-)-Propylnorapomorphine(以下简称NPA)对C6神经胶质瘤细胞(C6 gliomacells)的电压依赖性钾电流的作用,并初步分析了它们的作用机制.结果表明,HALO和NPA都能抑制C6细胞的K+电流,其抑制作用是可逆的,而且都与药物浓度有依赖关系.两者所抑制的主要是K+电流中的慢成分,而对快成分的作用有所不同.它们的抑制作用不是由多巴胺D2受体介导的,也不是通过G-蛋白或细胞内钙作用的,很可能是直接作用于钾通道.
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C6神经胶质瘤细胞的电压依赖性钾电流
本文用全细胞膜片箝方法对大鼠传代培养C6神经胶质瘤细胞(C6细胞)的电压依赖性K+电流进行了研究.实验共记录了97个细胞,膜电位均值(SD)为-47.5±9.4 mV.有7%的C6细胞没有外向K+电流.具有外向K+电流的细胞,维持电压在-70 mV时K+电流的激活阈值为-36.5±5.9 mV.通过对尾电流的分析其逆转电位(SD)为-84.6土4.1 mV,接近于K+平衡电位.在记录的细胞中所含K+电流的成分不同,约占总数60%的细胞,其K+电流包含呈暂态的快成分和呈稳态的慢成分.约占总数33%的细胞只具有慢成分.
