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"活血开窍汤"对MCAO模型大鼠血脑屏障通透性的时效性影响
[目的]探讨"活血开窍汤"不同给药时间对大脑中动脉梗死(MCAO)模型大鼠神经功能恢复及血脑屏障的时效性影响.[方法]将48只MCAO模型Wistar大鼠随机分为模型组及活血开窍汤治疗组(Ⅰ组:造模后2 h给药组;Ⅱ组:造模后24 h给药组;Ⅲ组:造模后48 h给药组),每组12只,另有12只大鼠作为假手术组.采用Zealonga评分法观察各组大鼠神经功能缺损情况,取材前2 h于尾静脉注射伊文思蓝(EB)溶液以观察各组大鼠血脑屏障(BBB)的通透性,免疫组化法观察各组大鼠脑组织Claudin-5蛋白含量情况.[结果]各治疗组大鼠神经功能较模型组均有改善,且差异具有统计学意义(P<0.05).活血开窍汤Ⅱ、Ⅲ组大鼠脑缺血侧纹状体EB含量低于模型对照组(P<0.05), Claudin-5蛋白含量相对较高(P<0.05).而活血开窍汤Ⅰ组与模型对照组相比,活血开窍汤Ⅱ组与Ⅲ组相比,差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]活血开窍汤可通过减轻BBB通透性,减少Claudin-5蛋白的破坏从而保护MCAO大鼠血脑屏障,但在急性期对BBB的保护作用并不十分明显,且尚不能证明在非急性期越早给予活血开窍汤对BBB的保护作用就越显著.
关键词： 活血开窍汤 大脑中动脉梗死 血脑屏障 Claudin-5蛋白 -
高盐饮食加重脑缺血损伤机制
目的 探讨高盐饮食加重脑缺血损伤机制.方法 ①体内实验:高盐饮食14 d小鼠建立永久性大脑中动脉结扎(pMCAL)模型;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测小鼠脑组织损伤面积;伊文思蓝染色检测血脑屏障破坏程度;Western blot方法检测小鼠脑组织中微血管内皮细胞紧密连接蛋白claudin-5表达情况.②体外实验:Western blot方法检测高盐环境(80 mmol/L)及氧糖剥夺(OGD)+高盐(80 mmol/L)条件下bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞claudin-5表达情况.结果 ①TTC染色显示高盐饮食组小鼠脑缺血面积明显高于正常饮食组(P＜0.05);伊文思蓝染色显示高盐饮食组小鼠脑内伊文思蓝含量显著高于正常饮食组(P＜0.01);Western blot结果显示高盐饮食组小鼠脑组织中claudin-5表达明显低于正常饮食组(P＜0.05).②体外实验Western blot结果显示,与正常培养组相比,高盐组脑内微血管内皮细胞claudin-5表达显著降低(P＜0.01);与OGD组相比,OGD+高盐组,小鼠脑微血管内皮细胞claudin-5蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论 高盐饮食加重脑缺血损伤;高盐饮食可下调脑血管内皮细胞紧密连接蛋白claudin-5的表达,破坏血脑屏障,加重脑损伤.
关键词： 脑缺血 高盐饮食 脑内微血管内皮细胞 Claudin-5蛋白
