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大鼠小肠移植排斥反应期移植肠基因表达、ICAM-1和IL-2R分子表达及上皮细胞凋亡的变化
目的明确大鼠小肠移植排斥反应期移植肠粘膜IL-2、IFN-γ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA表达,移植肠IL-2R和ICAM-1表达,及移植肠上皮细胞凋亡的变化。方法选用近交系大鼠F344/N和Wistar/A进行全小肠异位移植。实验分为4组,第1组:Wistar;第2组:Wistar→Wistar;第3组:F344→Wistar;第4组:F344→Wistar+环孢霉素A(6 mg·kg-1·d-1,肌注)。术后第3、5、7天取各组动物移植肠标本进行病理学检查,应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测移植肠IL-2、IFN-γ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA表达,免疫组化检测移植肠IL-2R和ICAM-1表达,应用TUNEL法检测移植肠上皮细胞凋亡的变化。结果①病理学检查显示第3组大鼠在术后第3、5、7天分别符合轻、中、重度排斥,第2、4组无明显排斥征象;②第1组各检测基因基本不表达。第3组IL-2 mRNA表达在术后第5天显著高于第2组(P<0.05);IFN-γ mRNA表达术后始终非常显著地高于第2、4组(P<0.01);穿孔素、粒细胞酶B mRNA表达在术后第5、7天均高于第2、4组,且具有统计学意义;③第3组移植肠IL-2R表达术后始终显著高于三个对照组,仅在第3天ICAM-1表达高于对照组;④术后第3、5天第3组移植肠上皮细胞凋亡非常显著高于其它三个对照组。结论 IL-2、IFN-γ、穿孔素和粒细胞酶B的转录,移植肠IL-2R和ICAM-1表达以及移植肠上皮细胞凋亡在小肠移植排斥中发挥了重要作用;IFN-γ mRNA表达、IL-2R及上皮细胞凋亡可能成为临床上实用的早期、特异、敏感的诊断方法。通过改变这些分子的治疗策略可能促进目前抗排斥治疗策略的改进。
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