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红色毛癣菌菌株的PCR鉴定
目的用PCR方法扩增红色毛癣菌和须癣毛癣菌临床分离株的DNA,观察PCR指纹的差异以及基因型与传统表型的关系, 建立一种红色毛癣菌分子生物学鉴定方法.方法采用寡核苷酸重复序列 (GACA)4, (GTG)5及M13中心序列(5'-GAGGGTGGCGGTTCT-3')等3种引物,扩增 20株红色毛癣菌和须癣毛癣菌临床分离株的DNA,观察产物电泳带型的差异.结果在3种引物的扩增中,均可见红色毛癣菌和须癣毛癣菌呈现出具种特异性的DNA指纹,并检出其中2株原据表型鉴定为须癣毛癣菌的红色毛癣菌.结论红色毛癣菌可以用PCR方法加以鉴定,以(GACA)4作引物区分这两种菌为合适.
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应用M13引物PCR指纹法分析假丝酵母菌氟康唑耐药性
目的探讨M13微卫星引物PCR指纹法用于假丝酵母菌氟康唑耐药性基因分型的可行性.方法采用纸片扩散法分析假丝酵母菌氟康唑耐药性,并进一步对41株假丝酵母菌进行M13引物PCR指纹分析,采用RAPD200软件邻接法(neighbour joining,NJ)聚类分析电泳带型模式.结果41例主要从痰液和阴道分泌物中分离的假丝酵母菌标本中中,氟康唑药物敏感11株(26.8%),依赖8例(19.5%),耐药22例(53.7%),PCR指纹分析至少可检测到12种不同的条带,条带数目从2条到12条不等,电泳带型模式与感染部位和氟康唑药物反应性有关.结论假丝酵母菌氟康唑耐药性菌珠所占比例较大,M13微卫星引物PCR指纹法可用于假丝酵母菌的分子流行病学调查和氟康唑耐药性基因分型.