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CD150文献资料
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表达犬CD150的Vero细胞系的建立
目的 建立表达CD150基因的非洲绿猴肾细胞系Vero-CD150,提高犬瘟热病毒的分离效率.方法 分离健康犬血液中的白细胞,并克隆编码CD150的基因,构建真核表达质粒pIRES-CD150,将该质粒转染Veto细胞系.经过克隆化筛选获得Vero-CD150细胞系.利用RT-PCR、流式细胞仪(FCM)进行鉴定,同时对临床检测为阳性的自然发病犬,取肝、肺、脾脏等脏器为病料,接种于Vero-CD150细胞系.结果 RT-PCR和流式细胞仪皆检测到CD150在Vero细胞中能够稳定表达;与Veto细胞系相比,Vero-CD150细胞系的生长特性相似;接种病料后,感染细胞不仅产生明显的细胞病变,且用RT-PCR可检测到病毒核酸.结论 本试验使CD150基因能在体外转入正常的非洲绿猴肾细胞系Vero中,获得稳定表达CD150基因的Vero细胞亚克隆,并使后者结合CDV的能力明显增强.该细胞系的建立,为更有效的分离犬瘟热病毒打下了基础,可用于进一步研究.
