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犬黑素皮质素受体-2基因的分子克隆及序列分析
目的 分离犬MC2R基因cDNA 5'末端,分析其启动区域特点.方法 采用了RNA连接酶介导的RACE(RLM-RACE)技术分离了犬MC2R基因和局部序列比对工具(Basic Local Alignment Search Tool,BLAST)对CDS区进行了初步验证.结果 新分离了犬MC2R cDNA 的5'末端,并对其启动区序列作了初步分析.序列分析显示,该基因至少由两个外显子(exon1和exon2)组成,exon1和exon2的一部分编码5'非翻译区(5'-UTR),exon2其余的部分编码整个编码区.结论 克隆了犬MC2R基因的5'末端,在其启动区发现了inr、SF-1、SP1、CRE、PPRE、AP-1等多个顺式作用元件,为犬MC2R表达调控研究奠定基础.
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犬MC2R基因5'-UTR、3'-UTR序列测定、分析及其 5'侧翼启动区序列分析
目的 分离犬MC2R基因CDS部分序列和该基因5'、3'非翻译区,并对5'、3'非翻译区和5'侧翼的启动区进行分析.方法 本研究采用反转录PCR(RT-PCR)和RNA连接酶介导的RACE (RLM-RACE)技术和BLAST分析软件.结果 得到了5'、3'非翻译区和部分CDS片段的序列,他们的大小分别为168 bp、1 366 bp和987 bp,并预测了大约1 500 bp的5'侧翼的启动区域.结论 对它们进行分析显示,该基因至少由两个外显子(exon1和 exon2)组成,exon1 和exon2的一部分编码5'非翻译区(5'-UTR),exon2其余的部分编码整个编码区.其启动区有inr, SF-1, SP1, CRE, PPRE, AP-1等多个顺式作用元件,这些为犬MC2R表达调控研究提供研究奠定基础.