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食管癌TE-1细胞生物学性状的相关性研究
目的 研究食管癌TE-1细胞生物学性状.方法 ①将购自上海生命科学院的食管癌TE-1细胞株进行HE染色;②用MTT法绘制细胞生长曲线;③免疫组织化学检测细胞特异性免疫标志;④流式细胞仪分析细胞周期.结果 ①用DMEM高糖培养基培养,生长良好.HE染色下,细胞大致分为3种:一种细胞呈椭圆形,核大,胞浆少,一种细胞呈三角形或多角形,大小,形态不等,一种细胞有双核或者多核,核大深染,染色质丰富,核分裂相多见;②细胞接种培养后其生长曲线呈近似S形.免疫组织化学检测3种抗体均表达阳性,其中CK7阳性表达定位于胞浆,Ki-67和p53定位于胞核;③TE-1细胞周期:半数细胞处于增生期,半数处于静止期.结论 食管癌TE-1细胞符合食管鳞癌的特征.
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人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中肿瘤干细胞的培养分化及增殖侵袭能力分析
背景：研究发现，食管癌组织中存在一类细胞亚群，具有一定的侵袭和转移性能，与治疗效果之间存在十分密切的联系。目的：从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离富含肿瘤干细胞的细胞球，并对其增殖和侵袭能力进行分析。方法：运用无血清培养基培养KYSE-150、TE-1细胞，观察细胞球的生成情况，采用MTT法以及Transwel小室实验检测细胞的增殖情况和侵袭能力，流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达。结果与结论：①KYSE-150、TE-1细胞在无血清培养条件下可以获得稳定传代的细胞球。②细胞球的增殖能力和侵袭能力均显著高于亲本细胞(P <0.05)。③TE-1细胞球和KYSE-150细胞球的CD44+、CD271+、CD44+CD271+细胞比例均显著高于TE-1亲本细胞和KYSE-150亲本细胞(P <0.05)。④实验结果提示，从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离出具有肿瘤干细胞特性的细胞球，具有很强的增殖和侵袭转移能力，且CD44和CD271可以作为重要的食管癌干细胞表面标志物。
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HSP90在胆管癌组织与细胞中的表达及17-AAG对胆管癌细胞株的影响
目的:探讨HSP90在胆管癌组织与细胞中的表达情况及17-AAG对胆管癌TE-1细胞株的影响.方法:选择我院201 5年7月-2016年7月收治的40例胆管癌患者作为研究对象,分别检测患者胆管癌组织、癌旁组织及正常组织的HSP90 α表达情况,应用不同浓度的17-AAG对胆管癌TE-1细胞株进行处理并检测HSP90及其效应蛋白HIF-1 α的表达情况.结果:胆管癌组织的总阳性率为82.5％,高于癌旁组织的35.0％与正常组织的20.0％(均P＜0.05).胆管癌组织的强阳性表达率为37.5％,高于癌旁组织的10.0％与正常组织的5.0％(均P＜0.05).患者胆管癌组织的HSP90 α表达与浸润深度、淋巴结转移无关(P＞0.05),但与TNM分期及肿瘤直径有明显相关性(P＜0.05).随着17-AAG处理浓度的升高,HSPg0α/β-actin、HIF-1 α/β-actin降低,不同处理浓度下胆管癌TE-1细胞株HSP90α及其效应蛋白HIF-1 α表达均有统计学意义(P＜0.05).结论:HSP90在胆管癌组织及细胞中高表达,且表达情况与临床分期及肿瘤直径有关.17-AAG可下调胆管癌TE-1细胞株中HSP90 α及HIF-1 α表达,对于临床治疗有一定指导作用.
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RNAi抑制食管癌TE-1细胞株血管生长素表达的实验研究
目的构建介导血管生长素(Angiogenin,ANG)短发夹RNA(Short hairpin RNA,shRNA)表达的真核质粒载体,研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术对食管癌细胞株TE-1中ANG表达的抑制作用.方法依据Tuschl等设计原则,以ANG为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA片段序列,经退火成互补双链,再克隆到载体pRNA-H1.1/Neo中构建重组质粒pRNA-H1.1/Neo-ANGahRNA.脂质体法转染重组质粒至食管癌TE-1细胞,以空质粒(pRNA-H1.1/Neo)转染为对照;半定量RT-PCR法及蛋白质印迹法分别观察TE-1细胞中ANG在核酸和蛋白水平表达量改变.结果①成功构建带ANG靶向的shRNA真核表达载体(pRNA-H1.1/Neo--ANGahRNA);②pRNA-H1.1/Neo-ANGahRNA转染TE-1细胞后,ANG在核酸和蛋白水平表达均较空载体pRNA-H1.1/Neo转染的对照组显著下降.结论成功构建真核表达质粒介导的ANG靶向RNA干扰重组质粒,转染TE-1细胞后能有效抑制ANG表达,为下一步利用RNAi技术抑制肿瘤血管形成以及局部侵袭和远处转移提供研究基础.
