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乙肝病毒e抗体和核心抗体二项阳性的DNA检测分析
乙肝病毒e抗体和核心抗体阳性在临床上大约可占2-10%,而人们对这部分人的基因检测往往比较忽略,其实这部分人群里也有少数有病毒的复制,具有一定的传染性,应引起临床重视.
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30860例HBsAg阴性人群血清抗-HBs和抗-HBc检测结果回顾性分析
目的 分析不同年龄、性别的HBsAg阴性人群血清抗-HBs和抗-HBc的检出情况.方法 收集30 860例HBsAg阴性人群血清抗-HBs和抗-HBc定量检测结果及资料,对抗-HBs和抗-HBc在不同年龄段和不同性别人群中的检出情况进行回顾性分析.结果 抗-HBs+、抗-HBc+、抗-HBs++抗-HBc+、抗-HBs-+抗-HBc-的检出率和抗-HBs≥100 IU/L的总检出率分别为22.06％、12.62％、48.78％、16.53％和37.06％,在不同年龄段差异均有统计学意义(P均＜0.01).抗-HBs≥100 IU/L的总检出率在1 ～10岁(33.98％)和≥41岁(31.02％)低,抗-HBc+和抗-HBs++抗-HBc+的检出率随年龄的降低而减低,而抗-HBs+和抗-HBs-+抗-HBc-的检出率随年龄的降低而增加；男性抗-HBs检出率和抗-HBs≥100 IU/L总检出率低于女性(P均＜0.01),而抗HBc+、抗-HBs+、抗-HBc+和抗-HBs-和抗-HBc-检出率高于女性(P均＜0.01).结论 低龄人群(1～10岁)具有较低的抗-HBs≥100 IU/L总检出率和较高的抗-HBs-+抗-HBc-检出率,对低龄人群乙肝疫苗接种应后续加强免疫.
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以乙肝病毒核心抗原HBcAg为载体的utrophin抗体的制备
目的 构建以乙肝病毒HBc为载体的带有utrophin的两个B细胞表位多肽的融合表达质粒pHBc-2UB,表达出融合蛋白并纯化,通过免疫新西兰大白兔获得抗utrophin的抗体.方法 通过DNA starⅡ模拟出utrophin的两个显著优势的B表位.用PCR法合成片段插入HBcAg序列的78位,将该合成片段克隆至pET28a载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白HBc-2UB,纯化后免疫新西兰白兔.再将该合成片段克隆至pGEX4-2载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白GST-2UB,用于检测两个表位的抗体.结果 测序结果表明重组质粒构建成功,SDS-PAGE电泳显示融合蛋白表达正确,ELISA检测到高滴度抗体.结论 以HBc呈现utrophin的B表位被成功表达和纯化,获得高滴度的与两个B表位结合的抗体,为utrophin检测和DMD治疗药物研究打下了基础.
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389例丙肝病毒感染者合并乙肝病毒感染的调查
目的通过对丙肝病毒感染者和正常体检者间的乙肝病毒5种标记物检出率的比较,探讨丙肝病毒感染与乙肝病毒感染的关系.方法ELISA法检测乙肝病毒五项指标.结果HBV5种标记物中,丙肝组与对照组间的抗-HBC检出率有统计学意义,且有相互关联,其列联系数为0.186.结论丙肝感染群体的乙肝病毒核心抗体阳性率明显高于一般人群.
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苏州地区抗-HBc阳性合格青年献血人群隐匿性HBV感染的血清学及分子生物学特性分析
目的 探讨苏州地区乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性合格的青年献血人群隐匿性HBV感染的生物学及血清学特性.方法 选取2013年10月至2016年6月乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性、核酸检测(NAT)有反应性的青年献血者120例作为研究对象,进行乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)定量检测和乙型肝炎两对半检测,对抗-HBc阳性标本进行病毒核酸提取和基本核心启动子区(BCP区)/前C区(PC区)及S区巢式PCR扩增,对扩增结果阳性标本进行基因测序及序列分析.结果 120例献血者中,抗-HBc(+)31例,其中22~25岁组25例,18~21岁组6例,差异有统计学意义(P<0.05);抗-HBs(+)89例,其中22~25岁组16例,18~21岁组73例.利用巢式PCR扩增法对抗-HBc(+)标本进行PCR扩增,其中1例BCP区阳性,2例S区阳性,均属于22~25岁组.S区阳性标本的分型和测序结果显示:2例均为B型HBV,与野生型DNA序列相比,其中1例存在氨基酸序列E44U变异,1例存在T532G变异.结论 对于HBsAg检测合格的抗-HBc(+)青年献血者,并不能保证其血液中一定不含有HBV DNA.为降低HBV经输血传播的风险,仍然需要进一步提高乙肝高流行地区核酸检测方法的灵敏度.
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核心抗体阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染分子生物学特性及追踪结果的研究
目的 了解我国核心抗体阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染(OBI)情况,分析血清学和分子生物性特征.方法 对HBsAg(-)、NAT检测无反应性的合格献血者血浆,进行乙肝两对半检测和anti-HBs定量检测,对核心抗体阳性标本进行病毒核酸提取,和BCP/PC区及S区巢式PCR扩增,对扩增结果阳性产物纯化后进行基因测序及序列分析,同时进行QPCR定量检测.对HBV DNA阳性的献血者进行追踪检测和分析.结果 在1 033名合格献血者中,抗-HBc(+)占47.4％,阳性率随年龄的增长而增加(P＜0.001),30岁以下年龄组为32.6％而到50岁以上年龄组为为69.8％.777/1033为抗-HBs(+),占75.2％.在抗-HBc(+)人群中共检出14例HBV DNA(+),其中7例抗-HBs滴度在100 IU/L以上,在抗-HBc(+)合格献血者中OBI阳性率为2.86％.8/14例OBI为B型,1例为C型.7/14能追踪的标本中,1例发现抗-HBe血清转换为阳性.所有追踪标本的病毒均变成检不出.5例BCP/PC区序列发生突变,3例S区氨基酸变异.结论 经HBsAg及NAT检测合格的抗-HBc(+)献血者,其血液中仍有一定几率含有HBV DNA,存在经输血传播病毒的威胁,提示在乙肝高流行地区需进一步提高核酸检测方法的灵敏度,必要时可增加抗-HBc的检测.
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深圳市18 ～ 25岁抗-HBc阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染的血清学和分子生物学特性分析
目的 了解深圳市18 ～ 25岁抗-HBc阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染情况,分析血清学和分子生物性特征.方法 对HBsAg(-)、NAT检测无反应性的18 ～25岁合格献血者血浆进行乙肝两对半检测和抗-HBs定量检测,对抗-HBc阳性标本进行病毒核酸提取和BCP/PC区及S区巢式PCR扩增,对扩增结果阳性产物纯化后进行基因测序及序列分析,同时进行QPCR定量检测.结果 在889名18 ～25岁HBsAg(-)、NAT检测无反应性的合格献血者中,抗-HBc(+)共231名,占总人数25.98％(231/889),其中18 ～21岁组70名,占该组19.72％(70/355),22～25岁组161名,占该组30.15％ (160/534);抗-HBs(+)共568名,占总人数63.89％(568/889),其中18～21岁组218名,占该组61.41％(218/355),22～25岁组350名,占该组65.54％(350/534);对197例抗-HBc(+)标本利用巢式PCR对HBV S区及BCP/PC区扩增,2例S区阳性,占1.02％ (2/197),5例BCP区阳性,占2.54％(5/197),且均属于22 ～25岁组.对S区阳性PCR产物测序,发现2例均为B型,DNA序列与野生型相比,1例在532号位点由T变异为G,即T532G,氨基酸序列未发生变异.另1例氨基酸序列发生E44U变异.结论 经HBsAg及NAT检测合格的抗-HBc(+)献血者,其血液中仍有一定几率合有HBV DNA,需进一步提高核酸检测方法的灵敏度.
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乙肝病毒核心抗体阳性供体活体肝移植术后安全性评价
目的 探讨活体肝移植中,乙肝表面抗原(HBsAg)阴性而乙肝病毒核心抗体(HBcAb)阳性的供体在切肝术后的安全性问题.方法 2002年3月至2006年7月我院共施行50例成人活体肝移植中,52例供体有4例HBsAg阴性而HBcAb阳性,其余供体乙肝标志物全为阴性.有2例HBsAg阴性而HBcAb阳性供体接受左半肝切除,其余50例供体均接受不包括肝中静脉的右半肝切除.比较术前HBcAb阳性和阴性两组供体肝功能指标,动态观察术后肝功能及乙肝标志物情况、残肝再生情况及其他临床指标.结果 两组供体术前肝功能指标差异无统计学意义,术后肝功能恢复、并发症发生率、残肝再生速度及住院时间差异无统计学意义;乙肝病毒标志物与术前比较两组均无变化.结论 HBsAg阴性而HBcAb阳性供体的健康成人作为活体肝移植供体是安全的.
