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慢传输型便秘大鼠结肠Cajal间质细胞自噬现象的发生及钙离子水平的定性分析
目的 探讨慢传输型便秘(STC)大鼠结肠Cajal间质细胞(ICCs)自噬现象的发生情况,并定性分析其钙离子浓度水平的变化.方法 选用SPF级健康Wistar雄性大鼠40只,按照随机数字表法分为对照组(n=20,正常大鼠)和模型组(n=20,造模大鼠).采用复方苯乙哌啶制备STC大鼠模型,记录大鼠粪便粒数、每粒粪便质量、大鼠体重及首粒黑便排出时间的变化,判定模型成功建立与否.免疫荧光检测两组大鼠结肠ICCs形态变化,透射电镜检测结肠ICCs自噬情况,免疫荧光法测定ICCs中的钙离子浓度.结果 对照组大鼠试验期间均生长良好,模型组1例死亡.模型组大鼠日均粪便粒数及造模第30天模型组平均体质量较对照组明显减少(P＜0.05),平均每粒粪便质量较对照组升高(P＜0.05),首次排黑便时间较对照组明显延长(P＜0.05).对照组大鼠结肠组织中的ICCs细胞相互交织相连形成了密集且精密的网状结构,存在条形分支.模型组大鼠肠道内ICCs细胞数量明显减少,ICCs交互网络稀薄,细胞变窄变细.与对照组比较,模型组中ICCs细胞自噬泡数量上升且表现出明显细胞自噬性死亡.对照组大鼠中ICCs细胞胞体平滑且细胞分叉,细胞间连接成网络结构.STC大鼠ICCs中荧光斑点数量及荧光强度与对照组比较,明显升高.结论 STC大鼠肠道内ICCs的数量减少是发生了细胞自噬现象.STC大鼠模型中ICCs细胞内游离Ca2+升高,Ca2+升高可能是导致ICCs自噬性死亡的原因.
关键词： 慢传输型便秘 结肠Cajal间质细胞 自噬现象 大鼠 钙离子浓度 -
HCN1,HCN2在功能性便秘大鼠结肠的分布及其与Cajal间质细胞的共存关系
目的:观察HCN1,HCN2在功能性便秘(function constipation,FC)大鼠模型结肠上的表达及其与结肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞之间的关系,探讨HCN1,HCN2对FC发病的影响.方法:用复方地芬诺酯制造FC大鼠模型,利用免疫组织化学分别对模型组(n=12)、空白组(n=12)大鼠升结肠、横结肠、降结肠黏膜HCN1,HCN2及ICC的表达情况进行检测.结果:模型组和空白组升结肠、横结肠及降结肠均见HCN1,HCN2,c-Kit表达,模型组中HCN1,HCN2,c-Kit表达量明显低于空白组(P＜0.05);HCN1表达在FC大鼠结肠中主要分布在结肠环形肌和纵行肌之间的肌ICC-MY,与c-Kit表达分布基本一致;HCN2在FC大鼠升结肠、横结肠及降结肠均有分布与c-Kit荧光度变化趋势基本一致.HCN2阳性神经元与ICCs的突起距离较近,二者未见细胞共存现象.结论:HCN通道作为一种与自主起博活动密切相关的离子通道,可能参与结肠ICCs的自主起博活动.HCN1,HCN2可能参与结肠运动调控,其数量、功能及分布异常可能与FC发病机制有关.
关键词： 功能性便秘 HCN1 HCN2 结肠Cajal间质细胞
