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骨折愈合应力适应性的研究
本研究通过传感器电测技术、光导纤维在体植入观察与X线灰度分析方法研究了骨折愈合的应力适应性,探讨了骨折端受力、肌肉动力、骨痂密度、血管再生与骨折愈合的关系.对骨折愈合过程活体断端力学环境、活体组织学变化过程及愈合组织的物质梯度连续变化进行了开创性的实验和理论研究.
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部份背根切断对备用根尾侧段脊髓Ⅱ板层trkC表达的影响
目的:大量的研究已证实部分背根切断后猫脊髓背角具有可塑性.我们前面的研究已观察了部份背根切断对备用根节段L6头侧L3、L5脊髓Ⅱ板层和L3背核trkC表达的影响,本文进一步探讨部份背根切断后备用L6节段尾侧L7脊髓Ⅱ板层trkC的表达.方法:用成年雄猫15只分正常组、术后3 d及10 d组(切除L1-L5,L7-S2,DRG保留L6DRG为备用根),取正常组一侧,术后3 d及10 d组手术侧的L7脊髓制作20 μm厚冰冻切片,用trkC抗血清(1∶1000, Santa Cruz)行免疫组化ABC法染色.观察并测量trkC在成年猫脊髓的分布及部份背根切断后L7脊髓背角Ⅱ板层trkC的平均灰度(反应trkC的相对含量)变化.结果:trkC的免疫阳性反应物主要分布于灰质腹角及背角深部的神经元,胞浆染色Ⅱ板层阳性细胞少见,但有均质状trkC阳性反应.灰度分析结果显示:术后3 d组手术侧Ⅱ板层trkC的平均灰度值均较正常者明显升高(P＜0.05).而术后10 d时又较3 d者明显回落(P＜0.05),但仍未恢复至正常者水平.表明,术后3 d,L7平面Ⅱ板层trkC的含量明显减少,而术后10 d时,trkC的含量又明显恢复,但仍低于正常者水平.提trkC可能与L7脊髓Ⅱ板层可塑性有关.由于trkC为NT3提供了必要的结合位点,故Ⅱ板层trkC的含量变化还可能提示NT3与脊髓可塑性有关.基于我们在其它研究中已观察到部份背根切断后备用根L6节段头侧的L5平面术后10 d时Ⅱ板层trkC的含量已恢复至正常者水平.结论:结合本文L7平面虽有恢复但仍未达到正常水平的结果,提示备用根L6平面头尾平面trkC的含量恢复有差异,分析这可能是备用根中枢终末在备用根节段头侧侧枝出芽生长速度大于尾侧的原因之一.
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ImageJ软件在重组质粒pET32a-CDK2中蛋白表达的应用
目的 应用Image J软件探索细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)在重组质粒pET32a-CDK2中的蛋白表达条件.方法 将重组质粒pET32a-CDK2转入表达菌株BL21 (DE3),然后在不同时间点(0、1、2、3、4h)和不同浓度(0.5、1、2 mmol/L)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)下诱导表达目的蛋白CDK2,对CDK2采用SDS-PAGE法进行蛋白电泳,并应用Image J软件对电泳条带进行灰度分析.结果 CDK2诱导表达量在不同时间点差异有统计学意义(P＜0.001),其中0h与1h、2h、3h、4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.007,P＜0.001,P＜0.001,P＜0.001)；1h与3h和4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.001)；而2h和1h、3h、4h诱导表达量的差异均无统计学意义(均有P＞0.05)；不同浓度IPTG下的CDK2诱导表达量差异无统计学意义(P=0.336,P=0.240,P=1.000).结论 根据Image J软件分析结果,采用0.5 mmol/L浓度IPTG 2h的条件,节约诱导时间和试剂用量.
关键词： ImageJ分析软件 细胞周期依赖性蛋白激酶2 原核表达 灰度分析 -
STAT3与Survivin在宫颈癌组织中的表达及意义
目的:研究信号转导与转录调控因子3(STAT3)和存活素(Survivin)在宫颈癌及正常宫颈组织中的表达,探讨其与宫颈癌的发生、发展、转移的关系.方法:采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测30例宫颈癌组织、10例宫颈上皮内瘤样病变组织(CIN)和10例正常宫颈组织中STAT3和Survivin的表达,并应用自动图像分析仪定量分析 STAT3和Survivin在宫颈癌组织中表达的相对含量(灰度).结果:STAT3在正常宫颈组织中的阳性表达率为10%,在CIN组织中的阳性表达率为30%,差异无显著性(P＞0.05),但有升高趋势.STAT3在宫颈癌组织中的阳性表达率为73.33%,与正常宫颈组织相比,差异有显著性 (P＜0.05),与CIN组织相比,差异无显著性(P＞0.05).Survivin在正常宫颈组织中的阳性表达率为0%,在CIN组织中的阳性表达率为40.00%,两者相比,差异有显著性(P＜0.05).Survivin在宫颈癌组织中的阳性表达率为86.67%,与正常宫颈组织相比,差异有显著性(P＜0.05);与CIN组织相比,差异有显著 性(P＜0.05).STAT3 和Survivin的平均灰度值均与宫颈癌的临床分期、组织分化和淋巴结转移显著相关(P＜0.05).STAT3及Survivin在宫颈癌组织中的表达亦有明显的相关性(P＜0.05).结论:STAT3和Survivin与宫颈癌的恶性 程度、进展及转移有关,且两者之间有明显的相关性,表明宫颈癌的发生发展可能与STAT3信号传导通路激活,细胞凋亡受抑制有关.
关键词： 信号转导与转录调控因子3 存活素 宫颈癌 免疫组化技术 灰度分析
