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低温冷冻对皮肤组织桥粒芯糖蛋白1表达影响的实验研究
目的 观察桥粒芯糖蛋白1(Desmoglein1,Dsg1)在不同温度保存皮肤组织中的分布,以探讨其与皮肤冷冻损伤的关系.方法 用Dsg1抗体对5种保存条件下的皮肤组织作免疫组化染色,采用计算机图像定量分析方法测定表皮组织中的含量,并用H.E染色观察皮肤的组织结构变化.结果 与新鲜皮片组相比,-196℃条件下皮肤组织结构保存较好,Dsg1含量变化不明显,而4℃、-20℃、-80℃保存皮肤组织结构破坏明显,含量亦明显下降.结论 皮肤低温保存冷冻损伤可能与桥粒跨膜蛋白Dsg1破坏有关.
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LOX-1介导oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞高通透性反应
目的 探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor 1,LOX-1)在氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮高通透性反应中的作用.方法 采用Transwell单层细胞模型系统和油红O染色,观察oxLDL或和LOX-1阻断抗体对单层血管内皮细胞LDL通透性的影响以及下室THP-1巨噬细胞内脂质的蓄积情况;用Westernblot法和激光扫描共聚焦显微镜检测oxLDL或和LOX-1阻断抗体对桥粒芯糖蛋白1(DSG1)在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中表达和分布的改变.结果 oxLDL可以增加单层内皮细胞对LDL的通透性和下室THP-1巨噬细胞脂质的蓄积,同时降低DSG1的表达及其在细胞间分布的连续性,而抑制LOX-1可以减弱内皮细胞的高通透性反应和巨噬细胞脂质蓄积.结论 oxLDL可能是通过降低桥粒蛋白表达使内皮细胞构型改变来诱导内皮高通透性,从而促进内皮下巨噬细胞内的脂质蓄积,其机制可能涉及LOX-1的介导.
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皮肤鳞状细胞癌和角化棘皮瘤中桥粒芯糖蛋白1和E-钙黏着蛋白表达的研究
皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和角化棘皮瘤(keratoacanthoma,KA)是皮肤科较常见的起源于角质形成细胞的肿瘤.
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不同低温保护剂对皮肤组织桥粒芯糖蛋白1表达影响的比较
目的 比较两种不同低温保护剂对皮肤组织桥粒芯糖蛋白1(desmoglein 1,Dsgl)低温保存后表达的影响,为寻求皮肤组织低温保护剂的优良配方提供实验依据.方法 取烧伤患者整形术后自愿捐献所余大腿部刃厚皮片5块,于取皮后4 h内进行实验.根据冷冻时添加保存剂不同,将皮片分为3组.A组(n=2):0.5 mol/L的海藻糖/DMSO:B组(n=2):传统低温保护剂DMSO/丙二醇;置于-196℃液氮中分别储存7、21 d后复温取材进行实验;C组(n=1):新鲜刃厚皮片,不作任何保护剂处理.对各组皮片行免疫组织化学染色观察,RT-PCR方法检测皮片Dsgl基因水平.结果 免疫组织化学染色见储存7 d后,A、B组Dsg 1蛋白染色均呈棕黄色,分布较均匀,表皮基底细胞表达信号与C组相似;A、B组吸光度(A)值分别为0.285±0.006、0.284±0.004;与C组0.287±0.008比较差异无统计学意义(P＞0.05).储存21 d后,A组阳性细胞表达无明显减弱,B组强度减弱;A、B组A值分别为0.282±0.004、0.275±0.005,B组与A、C组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测示C组、储存7 dA、B组及储存21 dA、B组Dsg 1基因表达A值分别为0.814±0.012、0.810±0.012、0.803±0.008、0.806±0.008及0.782±0.013.储存后21 dB组和A、C组比较筹异有统计学意义(P＜0.05),余时间点组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 海藻糖与DMSO联合应用对皮肤组织Dsg1的保护作用优于DMSO/丙二醇.
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皮肤鳞状细胞癌和光线性角化病的免疫组化研究
目的探讨光线性角化病[AK]的性质以及其与鳞状细胞癌(SCC)的关系.方法用免疫组化的方法研究了桥粒芯糖蛋白1(Dsg1)和E-钙黏着蛋白(Ecad)在鳞状细胞癌和光线性角化病中的表达.结果与正常人皮肤相比桥粒芯糖蛋白1和E-钙黏着蛋白在光线性角化病中的表达减弱,在鳞状细胞癌中的表达显著减弱或完全消失,但两者在角化不良细胞处的表达非常相似.结论光线性角化病应及早治疗以阻止其发展.
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两种老年性皮肤肿瘤Dsg1和E-cad的表达
目的比较两种老年人常见的皮肤肿瘤-鳞状细胞癌(BCC)与基底细胞癌(SCC)的生物学行为的异同.方法用免疫组化方法检测了26例SCC、30例BCC及10例正常皮肤组织中桥粒芯糖蛋白1(Dsg1)和E-钙黏着蛋白(E-cad)的表达.结果 Dsg1在BCC和SCC中的表达均显著减弱或完全消失;E-cad在SCC中的表达显著减弱,而在BCC中的表达却为阳性.结论 BCC和SCC侵袭性生长的特性与Dsg1的低表达有关,SCC易发生转移的特性与E-cad的低表达有关.
