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重组人TFAR19蛋白对羟基喜树碱诱导人7721肝癌细胞凋亡的增敏作用
目的:探讨新的人凋亡相关基因产物TFAR19蛋白对羟基喜树碱诱导人7721肝癌细胞凋亡的增敏作用.方法:将不同浓度的rhTFAR19蛋白单独或与羟基喜树碱(hydroxy camptothecin,HCPT)同时加入处于指数生长期的7721肝癌细胞中共同培养,通过透谢电镜、DNA片段化分析、PI及Annexin V标记进行流式细胞仪分析，观察细胞的形态学和细胞凋亡的变化。结果：不同质量浓度的rhTFAR19蛋白单独作用于7721肝癌细胞未见明显凋亡，但同时加5mg·L-1的羟基喜树碱后，各质量浓度组均观察到细胞凋亡，并且显示了明确的量效关系：5mg·L-1的HCPT加5mg·L-1 rhTFAR19蛋白的细胞凋亡率为29.58%，而加20 mg·L-1rh TFAR19 蛋白的细胞凋亡率为63.77%.结论:rhTFAR19蛋白对HCPT诱导的细胞凋亡有明显的剂量依赖性促进作用,临床用HCPT行局部化疗时,若加rhTFAR19蛋白,可能会在不增加化疗药物毒性的情况下,提高化疗效果.
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用荧光差异显示法分离新的肝细胞癌相关基因
目的:寻找新的肝细胞癌(hepatocellular carcinom a, HCC)相关基因.方法:应用荧光-差异显示(fluorescent differential display)技术分析人HCC、配对非癌肝、胎肝、正常肝等组织之间的基因差异表达,差异表达cDNA片段,经测序后,再用RNA狭缝杂交对部分差异片段在上述4种组织中的表达进行验证.结果:共得到差异表达cDN A片段110条.经狭缝杂交筛选,获得了4条阳性片段,未知cDNA片段L2和与人醛缩酶B 99.5%同源的cDNA片段L7 在部分HCC中特异性低表达,未知cDNA片段LC27和与人Nip3基因99.4%同源的cDNA片段LC20在部分HCC中特异性高表达.结论:确认了4条HCC相关基因.其中L2和人醛缩酶B基因可能为阻抑HCC发生、发展的基因,而人Nip3基因和LC27可能为促进HCC发生、发展的基因.L2和LC27 为目前未知的新基因.
