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乙型/基因疗法文献资料
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阳离子脂质体对反义寡核苷酸抗乙型肝炎病毒作用的促进
目的:考察阳离子脂质材料3β-N-(N′, N′- 二甲基胺乙基) 胺基甲酰基胆固醇(3β-N-(N′, N′-dimethylaminoethane)-carbamoyl cholesterol, DC-chol)与反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide ,asODN)的结合能力及asODN阳离子脂质体的细胞毒性和抗病毒活性.方法:以DC-chol从水相中萃取asODN的萃取率评价不同条件下DC-chol与asODN的作用力;通过四唑盐比色法检测含DC-chol的阳离子脂质体对HepG2 2.2.15 的细胞毒性;以酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清培养液中HBsAg和HBeAg的含量,考察不同asODN阳离子脂质体的抗病毒活性.结果:当正负电荷比>0.6时,DC-Chol能有效的从水相中萃取asODN (萃取率80%～100%);碱性条件和强离子(Na+/Cl-)的存在不利于DC-Chol与asODN的作用;DC-chol阳离子脂质体具有一定的细胞毒性,在低质量浓度时(0.84～26.94 mg*L-1)脂质体的细胞毒性与DC-chol浓度成正比;当asODN在1.25～5.00 μmol*L-1时,其抗病毒活性与剂量相关;脂质体可提高asODN对乙肝病毒的抗病毒活性,其中阳离子脂质体对asODN抗病毒活性的促进作用较明显(从60%到95%).结论:表面修饰DC-Chol阳离子脂质体能有效地促进asODN的抗乙肝病毒活性.
