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  • α1D受体cDNA转染细胞、大鼠主动脉组织及其培养细胞的细胞膜色谱研究

    作者:张典;袁秉祥;邓秀玲;杨广德;贺浪冲

    目的 为了增加细胞膜色谱法的选择性和特异性,用细胞膜色谱法分别研究不同浓度药物BMY7378(α1D-AR亚型高选择性药物)与大鼠主动脉组织、原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞和α1D-AR转染细胞膜色谱柱的生物亲和作用.方法 根据大鼠主动脉细胞表达以α1D-AR占优势,分别构建大鼠主动脉组织匀浆细胞膜色谱柱、培养大鼠主动脉平滑肌细胞膜色谱柱和受体质粒转染所得受体高表达HEK293 α1D细胞膜色谱柱.用细胞膜色谱法研究6种浓度的BMY7378与受体的亲和色谱特性,分别测定其容量因子并进行相关性分析.结果 在大鼠主动脉组织制备的细胞膜固定相(cell membranestationary phase,CMSP)上,小检测到的BMY7378浓度为1.00 mmol·L-1;在大鼠主动脉平滑肌细胞CMSP上,小检测到的BMY7378浓度为0.03 mmol·L-1;在α1D-AR细胞CMSP上,小检测到的BMY7378浓度为0.10 mmol·L-1,结论与组织器官制备的CMSP的传统细胞膜色谱法比较,培养的细胞或细胞株色谱系统具有更高的灵敏度.可扩大细胞膜色谱法的应用范围,试用于受体亚型选择性药物的高效筛选.

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