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限制性内切酶Xcm Ⅰ文献资料
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一种高效T载体的构建及其对人端锚聚合酶HPS结构域的克隆
目的:制备一种高效T载体,并检测其克隆PCR产物的效率.方法:构建质粒pGH-T,它包含2个Xcm Ⅰ酶切位点,并在两位点间插入一段约600 bp的DNA序列.用Xcm Ⅰ彻底消化质粒pGH-T后,回收线性化大片段,即得T载体.利用此T载体克隆人端锚聚合酶(tankyrase)HPS结构域的PCR产物,并用限制酶切鉴定克隆的结果.结果:自制T载体可高效克隆PCR产物,其效率可达80%~100%.结论:自制T载体对PCR产物的克隆效率与商品完全相同,但使用方便且价格低廉.