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细胞融合病毒文献资料
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细胞融合病毒全长cDNA克隆的构建与鉴定
目的 分析细胞融合病毒基因组同源性,构建细胞融合病毒全长cDNA克隆,为进一步构建该病毒株的感染性全长cDNA克隆奠定基础.方法 通过DNAstar和Mega7.0构建了细胞融合病毒的系统发生树,对其基因和氨基酸序列同源性进行分析比对.选取细胞融合病毒Galveston株的全基因序列,通过体外基因合成的手段获得覆盖病毒全基因的3个DNA片段,并分别克隆至pBR002载体.利用限制性内切酶和T4连接酶将分片段基因组连入pACNR载体,终获得含有pACNR的细胞融合病毒Galveston全长cDNA克隆.根据Galveston病毒株基因组序列和pBR002载体的序列,利用DNAstar及Oligo6软件设计5对引物,用来对其连接处进行测序及鉴定.结果与结论 构建了细胞融合病毒系统发生树,明确了其进化地位和其他黄病毒的同源性关系. 构建出细胞融合病毒Galveston株全长cDNA克隆,经过酶切鉴定和序列测定表明所获得cDNA克隆为该病毒的全长序列.
