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miR-451对结肠癌细胞系SW620生物学行为的影响
目的 探讨miR-451对结直肠癌细胞SW620增殖、凋亡及侵袭能力的影响.方法 将SW620细胞分为4组:miR-451模拟物(miR-451 mimics)转染组(细胞转染miR-451 mimics,终浓度100nmol/L),NC组(细胞转染miRNA阴性对照,终浓度100nmol/L),空白转染组(加入与前2组等量的Lipofectamine 2000,无miRNA片段),对照组(细胞常规培养,不加入Lipofectamine 2000和miRNA片段).应用荧光定量RT-PCR检测转染24h后miR-451表达量的改变,采用CCK-8试剂盒检测转染24、48、72h后细胞的增殖能力,流式细胞仪检测转染48h后细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测转染24h后细胞侵袭能力的改变,细胞免疫荧光和Westernblotting检测转染48h后巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的表达情况.结果 转染后24h,荧光定量RT-PCR检测结果显示,miR-451mimics转染组的miR-451表达量(67.96±13.33)较NC组(以其miR-451表达量作为1)显著上调(P＜0.01).与另外3组比较,miR-451 mimics转染组细胞增殖能力在转染后48、72h明显受抑(P＜0.01),但转染后48h其细胞凋亡率无明显改变(P＞0.05).转染后48h,miR-451 mimics转染组、NC组、空白转染组、对照组中MIF蛋白表达阳性细胞的比例分别为23.9%±14.9%、53.5%±14.1%、45.2%±19.8%、59.3%±22.2%,统计学分析显示miR-451 mimics转染组与其他3组比较差异显著(F=7.356,P＜0.01).Transwell侵袭实验显示,miR-451 mimics转染组侵袭细胞数(37.4±6.1个/视野)明显低于对照组(61.6±8.6个/视野)、NC组(55.6±3.6个/视野)、空白转染组(60.8±7.4个/视野,P均＜0.01).结论 上调miR-451表达可抑制结直肠癌细胞的生物活性,该作用可能与抑制MIF表达有关.
关键词： MIRN451微小RNA 人 结直肠肿瘤 巨噬细胞游走抑制因子
