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5-羟色胺受体亚型mRNA在大鼠视网膜中的表达--RT-PCR法研究
目的观察大鼠视网膜内5-羟色胺(5-HT)受体各种亚型mRNA的表达.方法提取大鼠视网膜中的总RNA,用RT-PCR技术检测5-HT受体各种亚型mRNA的表达.将PCR产物进一步克隆入pCRII载体,然后进行序列检测,测得的序列均与已知的各5-HT受体亚型的cDNA序列进行Blast比较. 结果 5-HT受体亚型在阳性对照组中均呈阳性结果,各阳性条带的位置均与预期的各亚型PCR产物相符.经测序,证实产物确为预期的各5-HT受体亚型.RT-PCR结果显示,大鼠视网膜表达5-HT1A、 5-HT2A、 5-HT2C、 5-HT3和5-HT7受体亚型,且以上各受体亚型阳性条带的密度存在着差异,以5-HT7和5-HT2A高,5-HT2C和5-HT3次之,而5-HT1A较弱.5-HT1B、 5-HT1D、 5-HT1E、 5-HT1F、 5-HT2B、 5-HT4、 5-HT5A、 5-HT5B和5-HT6受体亚型没有阳性条带.结论大鼠视网膜上分布有多种5-HT受体亚型,包括5-HT1A、 5-HT2A、 5-HT2C、 5-HT3和5-HT7.提示5-HT能系统可能普遍存在于哺乳动物视网膜中,且通过不同受体亚型在介导rod感光信号的过程中扮演着重要的角色.
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雌二醇对去卵巢大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体亚型mRNA表达的影响
观察17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对去卵巢大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体mRNA表达的影响的时间效应.实验动物分为假去卵巢对照组(OVX+S组)和去卵巢组(OVX).去卵巢组大鼠又分为雌激素处理组(OVX+E+组)和无雌激素处理组(OVX+E-组),分别在处理后3、6、9和12 d时,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察5-HT1A和5-HT2A受体mR-NA在大鼠下丘脑的表达.结果显示:5-HT1A和5-HT2A受体mRNA在所有大鼠下丘脑均有表达;5-HT1A受体mRNA在3、6和9 d的OVX+E-组大鼠下丘脑的表达水平明显高于同时间点的OVX-E+组,而5-HT2A受体mRNA在6、9和12 d的OVX+E-组下丘脑的表达量也显著高于同时间点的OVX+E+组.本文结果表明去卵巢后大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体亚型mRNA7表达水平升高,17β-雌二醇可下调两种受体的表达.
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5-HT受体亚型mRNAs在大鼠背根神经节和三叉神经节的表达-原位杂交组织化学法研究
应用原位杂交组织化学技术观察了大鼠背根节和三叉神经节内5-HT2、5-HTa、5-HT4、5-HT5、5-HT6和5-HT7受体亚型mRNAs的表达.结果显示:在背根节和三叉神经节中均观察到了5-HT2A、5-HT3、5-HT4和5-HT7受体亚型mRNAs阳性细胞;两种神经节内上述受体亚型mRNAs阳性细胞的百分比不同.5-HT3受体亚型mRNA阳性细胞的百分比高,分别为30.4%(背根节)和32.8%(三叉神经节).约17.2%和14.6%的背根节和三叉神经节细胞分别呈5-HT2A受体mRNA阳性;而5-HT4和5-HT7受体亚型mRNAs阳性细胞在此二节中的百分比分别为14.9%、24.7%和11.2%、9.8%.各受体亚型mRNA阳性细胞均以中、小型节细胞为主.在各神经节内均未观察到5-HT2B、5-HT2c、5-HT5和5-HT6受体mRNA的表达.上述结果提示5-HT2A、5-HTa、5-HT4和5-HT7受体亚型在外周伤害性感受中可能发挥着重要的作用.
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5-HT2,4,5受体亚型mRNAs在大鼠不同节段脊髓背、腹角的表达
目的:观察5-HT2、5-HT4和5-HT5受体亚型mRNAs在大鼠脊髓不同节段的背角和腹角的表达. 方法:反转录聚合酶链式反应 (RT-PCR) 技术. 结果:5-HT2A受体亚型mRNA在颈、胸、腰段脊髓的腹角(VH)有强表达,高于相应节段的背角(DH);5-HT2C受体亚型mRNA在颈、胸、腰、骶段脊髓的DH和VH均有较强的表达,但在DH的表达水平要高于VH;5-HT4受体亚型mRNA在各节段脊髓DH和VH中的表达水平呈由颈髓到骶髓逐渐增高的趋势,而且在VH表达较强,在DH则较低;5-HT5A在脊髓的表达较弱,在各节段的表达水平基本一致,DH和VH之间没有差异. 在脊髓内没有检测到5-HT2B和5-HT5B受体亚型. 结论:上述5-HT受体亚型在脊髓具有不同的表达特点,提示它们在脊髓水平的伤害性感受和运动调节过程中可能发挥着不同的生理作用.
