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口腔副溶血链球菌Fap1非依赖性菌毛的电镜观察及相关体外黏附实验
目的 探讨副溶血链球菌表面Fap1非依赖性短菌毛结构的形态学表现及其在细菌黏附中的作用.方法 通过插入置换法构建Fap1蛋白系列缺陷株以去除Fap1依赖性长菌毛结构,电镜下观察细菌表面结构的形态学变化;系列缺陷株的黏附功能通过唾液包被的羟基磷灰石体外黏附实验加以评价.结果 所有Fap1蛋白形成缺陷株的菌体表面存在一种短菌毛结构,该种Fap1非依赖性菌毛垂直于细胞表面呈稀疏分布,长度不大于100 nm;体外黏附实验表明仅存在短菌毛结构的系列缺陷株的黏附功能与野生株相比有明显下降,但仍保持19% ~ 27%的黏附能力.结论 副溶血链球菌表面Fap1非依赖性短菌毛在细菌的黏附活动中仅起一定辅助作用.
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口腔副溶血链球菌黏附蛋白糖基化相关基因产物的亚细胞定位及黏附功能研究
目的 调查口腔副溶血链球菌黏附蛋白Fap1糖基化相关基因产物Gap1、Gap2和Gap3的亚细胞定位,以及相关基因缺陷株的黏附能力改变情况.方法 等位置换技术获得口腔副溶血链球菌黏附蛋白糖基化相关基因缺陷株gap1-、gap2-和gap3-,穿梭质粒构建该三种基因的补偿株,Western Blot检测Gap1、Gap2和Gap3在副溶血链球菌内的亚细胞定位;闪烁计数法检测gap1-、gap2-和gap3-对羟基磷灰石的黏附能力.结果 Gap1和Gap2被发现分布于所有亚细胞组分中,但主要集中于胞浆和胞膜内,而Gap3仅分布于胞浆和胞膜;体外黏附实验显示gap1-、gap2-和gap3-对羟基磷灰石的黏附能力显著下降.结论 糖基化修饰对副溶血链球菌黏附蛋白Fap1的黏附功能至关重要;Gap1、Gap2和Gap3可能在Fap1糖基化修饰过程中协同作用,该协同作用发生在胞内环境.