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microRNA-330-3p调控口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的实验研究
目的：探讨微小RNA-330-3p（miR-330-3p）对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的调控作用。筛选并验证相关靶基因。方法实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测口腔鳞癌细胞系、口腔鳞癌组织与癌旁正常上皮组织中miR-330-3p的表达情况。应用miR-330-3p抑制物（miR-330-3p inhibitor）和miR-330-3p模拟物（miR-330-3p mimics），分别转染口腔鳞癌细胞系（HN13）细胞，实时荧光定量PCR检测miR-330-3p的转染效率；然后应用细胞增殖、细胞克隆形成以及流式细胞术等实验技术，分别检测miR-330-3p上调和下调对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响。通过生物信息网站miRanda和TargetScan与本课题组前期基因芯片数据比对预测了9个可能的靶基因，并进一步用相关实验验证miR-330-3p对靶基因的负向调控作用。结果与癌旁正常上皮组织相比，口腔鳞癌组织中miR-330-3p的表达显著上调，平均表达水平为癌旁正常组织的1.75倍（n＝29，t＝5.282，P＝0.0045）；miR-330-3p抑制物和miR-330-3p模拟物，能分别显著降低或升高HN13细胞中miR-330-3p的表达量；转染miR-330-3p抑制物组HN13细胞增殖能力明显降低、凋亡率升高；而miR-330-3p模拟物组细胞的增殖能力明显升高、凋亡率降低。 miR-330-3p能够结合PDCD4的3’UTR，负向调控PDCD4的表达。结论 miR-330-3p能够与PDCD4的3’UTR结合抑制PDCD4的转录后翻译作用，从而促进了口腔鳞癌细胞的生长；其抑制物能发挥有效的抗癌作用，研究结果为口腔鳞癌的靶向基因治疗提供候选分子。
关键词： 微小RNA-330-3p 口腔鳞癌 增殖 凋亡
