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异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应
目的研究异种黑色素细胞疫苗对小鼠恶性黑色素瘤生长的抑制作用。方法制备异种黑色素细胞疫苗,皮下预防免疫小鼠后再接种恶性黑色素瘤, 并以该疫苗皮下注射治疗恶性黑色素瘤鼠, 随后测量肿瘤大小。采用51Cr释放法,体外分析小鼠脾细胞的细胞毒性T细胞(CTL)活性,以间接ELISA法检测小鼠血清抗肿瘤抗体。结果预防免疫使90%小鼠恶性黑色素瘤生长受到抑制,疫苗治疗使50%小鼠肿瘤生长受到抑制,免疫组鼠较对照组CTL杀伤活性在20∶1、10∶1、5∶1不同效靶比时,分别增高34.0%、24.1%及13.9%(P<0.05), 体内出现抗恶性黑色素瘤抗体。结论异种黑色素细胞疫苗可诱导小鼠抗恶性黑色素瘤特异性免疫反应,抑制肿瘤生长。
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异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理研究
目的研究异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理. 方法制备异种黑色素细胞疫苗,免疫小鼠.采用间接ELISA法检测小鼠抗肿瘤抗体滴度及抗体亚型,纯化免疫球蛋白及进行体外抗肿瘤增殖,采用Western blot法分析交叉抗原蛋白质.接种恶性黑色素瘤,观察肿瘤生长,采用免疫细胞去除法分析NK细胞及T细胞亚群对疫苗抑瘤效应的影响. 结果异种疫苗免疫后2周小鼠体内出现抗自身肿瘤抗体,产生的抗体以IgG为主,抗体认别的猪眼黑色素细胞及恶性黑色素瘤细胞交叉抗原为相对分子质量达180×103的蛋白质,纯化的免疫球蛋白在体外能抑制恶性黑色素瘤细胞增殖.异种疫苗诱导特异性保护性免疫反应使90%小鼠恶性黑色素瘤生长受到抑制,去除NK细胞不影响疫苗抑瘤效应,去除CD4+ T细胞使疫苗抑瘤效应消失,去除CD8+ T细胞70%小鼠恶性黑色素瘤生长仍受到抑制. 结论异种黑色素细胞疫苗诱导特异性体液免疫及细胞免疫反应,抑制恶性黑色素瘤的生长,CD4+ T细胞在这一过程中发挥了关键性作用.