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  • 嗜麦芽寡养单胞菌sul1、sul2基因与复方新诺明耐药关系

    作者:黄金伟;陈苏伟;黄建胜;丁茂文;陈丽珠;李国雄

    目的 检测sul1与sul2基因在嗜麦芽寡养单胞菌中的分布,并探讨其分布与耐复方新诺明的关系.方法 利用K-B纸片法筛选嗜麦芽寡养单胞菌对复方新诺明的耐药菌株,同时耐药菌株用微量肉汤稀释法测定复方新诺明低抑菌浓度(MIC),PCR法扩增全部细菌的sul1与sul2基因.结果 102株嗜麦芽寡养单胞菌有8株表现为耐复方新诺明,耐药率7.8%,8株中有4株sul1阳性,1株合并sul2阳性,并表现为对复方新诺明高MIC.结论 嗜麦芽寡养单胞蒲对复方新诺明的高度耐药性可能与sul1与sul2的存在有关.

  • 实时荧光定量PCR检测沙门菌flor基因和sul2基因方法的建立

    作者:曹堃;王元兰;刘宗梁;刘军军;魏建忠;孙裴;李郁

    目的 建立一种flor基因和sul2基因的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,为检测沙门菌的耐药性以及耐药基因分子流行病学调查奠定基础.方法 以氟苯尼考、复方磺胺甲噁唑抗性的沙门菌菌株为材料,根据GenBank中登陆的沙门菌flor和sul2基因序列,设计并合成引物,建立基于SYBR Green Ⅰ染料技术的Real-Time PCR检测体系,绘制出标准曲线并对其溶解曲线进行分析.结果 以pMD 18-T为载体构建的标准品的Ct值与样品的浓度的对数在一定范围内呈现良好的线性关系,两基因的检测域值较小,flor基因可以检测到102 copies/μL的样品,sul2基因可以检测到103 copies/μL的样品,经耐药性与基因表达量相关分析,耐药性较高的菌株其flor基因、sul2基因表达量也较高.结论 建立的检测沙门菌中flor因和sul2基因的荧光定量PCR方法具有很好的灵敏性、特异性和重复性,可以广泛用于临床中lor和sul2两种基因的检测以及沙门菌耐药分子流行病学的调查.

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