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rbf基因文献资料
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同源重组构建临床分离金黄色葡萄球菌rbf基因阴性突变株
目的 利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌rbf基因,构建金黄色葡萄球菌临床分离株金黄色葡萄球菌20(SAU20)rbf基因的阴性突变株.方法 构建pBT2-Δrbf质粒后将之电转入金黄色葡萄球菌RN 4220中,再次将pBT2-Δrbf质粒转入金黄色葡萄球菌临床分离株SAU20；利用pBT2载体对温度敏感的特点,使含重组质粒的SAU20在40℃多次传代,终筛选出金黄色葡萄球菌rbf基因的阴性突变株.结果 成功构建pBT2-Δrbf质粒,pBT2-Δrbf质粒被转入SAU20后,筛选到可疑突变株,经PCR及DNA测序证实SAU20 rbf基因被ermB基因置换.结论 利用同源重组技术敲除了金黄色葡萄球菌rbf基因,完成了金黄色葡萄球菌临床分离株SAU20 rbf基因的阴性突变株的构建,为今后研究金黄色葡萄球菌生物膜形成过程中rbf基因的作用及其机制提供了实验载体.
