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白术挥发油对LNCaP与DU145细胞表达性激素和PSA等指标的影响及意义
目的 研究白术挥发油对人前列腺癌细胞株的体外抗肿瘤作用. 方法 常规培养LNCaP和DU145细胞株.设4个对照组:不含血清的空白培养液(A组),含血清的培养液(B组),含血清培养LNCaP细胞(C组),含血清培养DU145细胞(D组).设6个实验组,C组加入白术挥发油浓度分别50 μg/ml(C1组)、250 μg/ml(C2组)及500 μg/ml(C3组),D组分别加入上述3种浓度的白术挥发油(D1组、D2组、D3组).10组细胞铺24孔板,每组均设3个复孔,两种细胞均分别按每孔2×106铺板.常规培养48 h后,6个实验组加入各自浓度的白术挥发油,4个对照组以等量培养液替代.电镜观察各组细胞凋亡现象,取各组培养液上清并冷离心收集标本,分别检测睾酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、tPSA和fPSA浓度.实验数据行多样本比较的统计学分析. 结果 C1和D2组生长抑制效应较好,LNCaP细胞呈时间效应正比关系,但DU145细胞仅在药物作用24 h后达到一次抑制率大化(60.96％).与对照组相比,C、D组T浓度均为0,E2分别为269 pg/ml和239.81 pg/ml,呈高表达(P＜0.05)；P组间变化差异不显著；VEGF、b-FGF和fPSA均呈高表达,2组分别为102.96 pg/ml、0.26 ng/ml、0.16 ng/ml和1763.40 pg/ml、6.41 ng/ml、0.44 ng/ml,以D组更明显(P ＜0.05)；tPSA分别为0.36 ng/ml和0.发生凋亡的C1、C2、C3和D3组中,T高由0升至0.37 ng/ml; E2高由239.81 pg/ml升至649.90 pg/ml(P＜0.05)；P高由0.98 ng/ml升至9.83 ng/ml(P＜ 0.01).VEGF、b-FGF和fPSA呈总体下降趋势.C2和D2组fPSA分别由0和0.04 ng/ml升至1.78 ng/ml和0.23 ng/ml. 结论 白术挥发油对人前列腺癌细胞具有一定的凋亡诱导作用.雄激素非依赖性DU145细胞在性激素、细胞因子和PSA等表达方面与雄激素依赖性LNCaP细胞有不同的特点.
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白术挥发油抗肿瘤作用的研究
目的 研究白术挥发油对动物移植性肿瘤的作用.方法 以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌(ECA)等为模型,观察白术挥发油的抗肿瘤作用.结果 白术挥发油以100 mg/kg及50 mg/kg剂量腹腔给药时,对ECA均有较强的抑制作用;且大剂量给药1次(150 mg/kg),可延长患瘤小鼠的寿命197%.结论 白术挥发油具有抑制肿瘤的作用.
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白术挥发油/β-环糊精包合物的表征
目的有效表征白术挥发油/β-环糊精(β-CD)包合物.方法采用X射线粉末衍射、扫描电镜、差热分析、红外光谱等手段,研究白术挥发油/β-CD包合前后理化性状等的变化.结果与β-环糊精相比较,包合物在X射线粉末衍射、扫描电镜、差热分析以及红外光谱等方面存在显著差异.结论白术挥发油/β-CD包合物形成后具有明显的特征,可表征包合的形成,同时为包合物制剂学研究和质量控制提供依据.
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白术挥发油化学成分及抗肿瘤实验研究
和zbo-1大剂量对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用均较弱,其中zbo-1大剂量(200 mg/kg)抗肿瘤作用强,抑瘤率为24.74%.结论 白术内酯Ⅱ为第1次从白术挥发油中分离得到;白术挥发油的抗肿瘤有效成分可能存在于白术挥发油中极性小的部位.
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白术挥发油提取方法研究
目的 建立白术挥发油高效液相色谱法(HPLC)定量分析方法.研究白术挥发油提取方法.方法 对3种有机溶剂和4种提取方法提取的4个产地挥发油提取率及挥发油中5个定量指标含量进行分析比较.结果 乙酸乙酯、正己烷、石油醚浸提挥发油提取率依次为2.76%,2.24%,1.96%,超声法的依次为2.54%,1.98%,1.86%.SPE法挥发油提取率为3.13%,水蒸气蒸馏法的为1.42%.挥发油含量浙江>安徽>湖南>河北.水蒸气蒸馏法与其他3种提取方法相比,苍术酮含量低1倍以上,桉叶醇含量低35倍,榄香烯含量为零,白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ含量高3倍以上.结论 研究建立的挥发油HPLC法定量分析方法简单、稳定可靠.SPE法为白术挥发油较好的提取方法.在没有SPE设备时,乙酸乙酯浸提法是白术挥发油较合适的提取方法.水蒸气蒸馏法提取白术挥发油并不科学.
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白术挥发油对大鼠心电图的影响
目的:观察白术挥发油对大鼠心电图的影响,以期观察本药对大鼠是否具有毒性作用.方法:给大鼠一定剂量的白术挥发油,观察用药后大鼠心脏系数、心率、心电图的变化情况,并与非用药组相比较.结果与结论:白术挥发油对大鼠心电图无明显影响.
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白术挥发油微乳的制备
目的 通过星点设计-效应面法筛选白术挥发油微乳优处方.方法 采用微孔稀释法结合伪三元相图优选乳化剂、助乳化剂及油的种类;通过星点设计-效应面法优化微乳处方.结果 空白微乳的佳处方质量比为聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40)-二乙二醇单乙基醚(TranscutoPI)-油酸聚乙二醇甘油酯(IabrfilM1944CS)-(H2O) (2.25:0.75:1.5:5.5),优处方中白术挥发油的质量分数为7.5％,制备的空白微乳粒径为21.2 nm,含药乳粒径为25.0nm.结论 所得白术挥发油微乳为澄清透明、黄褐色、均一的液体.
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紫外灯和太阳光照氧化对白术挥发油化学成分的影响
目的 优选白术挥发油(volatile oil from Atractylodis Macrocephalae Rhizoma,VOA)佳氧化分解条件,阐明紫外灯和太阳光氧化对VOA化学成分的影响.方法 采用超临界CO2萃取安徽产VOA,将其分别置于254 nm/8 W,365 nm/8W和254 nm/30 W紫外灯下进行光照氧化,HPLC跟踪检测苍术酮含量变化,以此筛选佳氧化分解条件;采用GC-MS联用技术分析紫外灯光照对VOA化学成分及相对含量的影响,并与太阳光照氧化分解产物进行比较.结果 VOA中苍术酮氧化分解速率为:254 nm/30 W＞254 nm/8 W＞365 nm/8 W.紫外灯和太阳光照氧化分解条件下,VOA中消失、新增及含量变化的化学成分有差异,但总体变化趋势相一致,即随着苍术酮和γ-榄香烯的氧化分解,Isovelleral、β-桉叶醇、广木香内酯、白术内酯I和白术内酯Ⅲ5种主要成分的含量显著增加.太阳光照氧化分解后Isovelleral和β-桉叶醇的含量较高,而紫外光照氧化分解后内酯成分的含量较高.结论 将VOA置于254 nm/30W的紫外灯下光照氧化是解决挥发油稳定性问题的良好途径,但从制药规模考虑,太阳光照氧化的成本更加低廉.
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白术挥发油的质量标准研究
目的:建立白术挥发油的质量控制方法,为新剂型的研发奠定基础.方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0～8 min,40％B～28％B;8～11.5 min,28％B～24％B;11.5～20 min,24％B ～ 21％B;20～ 25 min,21％B～5％B;25～35 min,5％B ～ 0％B;35 ～ 40 min,0％B);流速1.0 mL· min-1;含量测定波长220 nm;指纹图谱检测波长200 nm;柱温30℃.结果:挥发油的HPLC含量测定和指纹图谱分析方法学考察结果良好.15批挥发油的指纹图谱与共有模式之间的相似度在0.981～1.000之间,15批挥发油特征图谱及共有模式中的特征峰峰面积占总峰面积的91.175％～ 96.628％,平均百分比为94.49％.结论:建立的HPLC挥发油含量测定及指纹图谱分析方法简单、稳定、可靠,15批挥发油指纹图谱整体相似度较高,特征成分种类相近,但其相对含量有差异.
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应用高压均质技术制备白术挥发油-β-环糊精包合物
目的 考察高压均质法制备白术挥发油-β-环糊精包合物的佳工艺.方法 采用高压均质法制备白术挥发油β-环糊精包合物,设计L9(34) 正交试验,以包合物的包封率(%)及收率(%)为指标对β-环糊精包合物的处方进行综合评价,优化佳工艺.结果 白术挥发油包合物的佳制备条件为:挥发油与β-环糊精的质量比为1∶6,高压均质压力为7000 psi,均质次数为30次.结论 采用正交试验法所优选的高压均质法制备白术挥发油包合物适合于工业化生产.
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β-环糊精包合葶苈生脉方中白术桂枝混合挥发油的工艺研究
目的 研究β环糊精(β-CD)包合白术、桂枝混合挥发油的佳工艺.方法 采用正交试验法,以挥发油包合率、包合物收得率及包合物含油率为指标,优选饱和水溶液法包合挥发油的佳工艺;采用薄层色谱法(TLC)和紫外分光光度法(UV)对包合物进行鉴别分析.结果 饱和水溶液法包合白术、桂枝混合挥发油的佳工艺条件是:挥发油与β-CD投料比为1:6,包合时间为3h,包合温度为40℃.结论 此包合工艺简单、易行,能有效的保留白术、桂枝中挥发油成分,为葶苈生脉方的工业生产提供科学依据.
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白术挥发油对代谢综合征大鼠糖脂代谢的影响
目的:研究白术挥发油对代谢综合征大鼠糖脂代谢的影响.方法:采用高脂高糖高盐饮食法制备代谢综合征大鼠模型,造模成功后,分别灌胃二甲双胍(100mg/kg)和白术挥发油(100mg/kg和200mg/kg),给药6周后,取大鼠血清,检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)含量,同时观察白术挥发油对代谢综合征大鼠体重的影响.结果:与模型组相比较,白术挥发油能有效降低代谢综合征大鼠血清中FBG、FINS、TG、TC和LDL-C水平,提高胰岛素敏感性和HDL-C含量.结论:白术挥发油可通过提高胰岛素敏感性,从而改善代谢综合征大鼠的糖脂代谢.
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复方灵芝颗粒中白术挥发油-β-环糊精包合物的制备与表征
目的 考察复方灵芝颗粒的白术挥发油-β-环糊精包合物的制备与表征.方法 采用水溶液搅拌法和研磨法制备,物性鉴定采用红外、热分析、气相、薄层等多种光谱学和色谱学方法.结果 2种方法均能得到合格包合物'水溶性和稳定性大大提高,水溶液搅拌法包合物中挥发油含量较高,达到9.47%.结论 环糊精包合技术提高了有效组分白术油在颗粒剂中的稳定性.
关键词： 复方灵芝颗粒 白术挥发油 白术挥发油-β-环糊精包合物 -
超声法制备茵陈、白术挥发油包合物研究
目的 确定超声法制备茵陈、白术挥发油-β-环糊精(β-CD)包合物的佳工艺.方法 以挥发油的包合率和包合物收率为指标,采用正交设计优化包合工艺的条件.结果 包合工艺的佳条件为:挥发油与β-CD投料比为1:4(mL:g),β-CD与加水量的比为1:10(g:mL),超声时间为45 min.该条件下包合率为78.9%,包合物收得率为87.6%.结论 此制备工艺包合效果较好,具有可行性.
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白术挥发油对小鼠耐缺氧能力的影响
目的:观察白术挥发油的体内外抗氧化作用.方法:测试白术挥发油对DPPH的清除百分率以评价其体外抗氧化作用.常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验、急性脑缺血缺氧实验观察白术挥发油(0.25,0.5,1.0 g/kg)连续灌胃28天后对小鼠耐缺氧能力的影响.结果:体外试发现验白术挥发油对DPPH清除率＞50％.连续灌胃白术挥发油28天能显著延长小鼠常压缺氧下存活时间和断头喘气时间,增加亚硝酸钠中毒后呼吸次数,显著降低血MDA水平并提高SOD、CAT活性.结论:白术挥发油具有一定的提高机体耐缺氧能力的作用.
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和胃理肠丸中白术挥发油的提取及包合工艺的研究
目的:优选和胃理肠丸中白术挥发油的提取工艺及包合工艺.方法:采用正交试验设计,以白术挥发油得率为指标优选提取工艺;以包合物收率及挥发油包合率为指标优选包合工艺,并用薄层色谱法对包合物进行鉴别.结果:优选的提取工艺为白术粗颗粒,加水10倍量,提取6 h;包合物的制备工艺为:β-CD与白术挥发油的投料比为6∶1,加水3.5倍,研磨75 min.结论:提取工艺与包合工艺合理可行,适合工业化生产.
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正交法优选β-环糊精包合白术挥发油的工艺研究
目的:对β-环糊精包合白术挥发油的工艺进行优选.方法:采用正交试验法,从白术挥发油与β-环糊精的比例,包合时间以及包合温度等方面进行筛选.结果:白术挥发油与β-环糊精的佳包合工艺条件为二者比例1:10,包合时间15min,包合温度30℃.结论:此工艺可行,为白术挥发油在生产中的应用提供了理论依据.
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白术挥发油对小鼠H22肝癌血道转移的抑制作用及机理研究
目的:探讨白术挥发油对小鼠H22肝癌血道转移的抑制作用及相关机理.方法: ELISA法检测小鼠H22肝癌血道转移模型血清中MMP-9的表达.结果: 白术挥发油各剂量组对小鼠H22肝癌血道转移模型的肺转移率有明显抑制作用;白术挥发油能显著降低H22肝癌血道转移模型小鼠血清中MMP-9的含量;结论白术挥发油可能通过抑制MMP-9的分泌起到抗肿瘤侵袭转移的作用.
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白术挥发油对小鼠H22肝癌淋巴道转移模型的影响
目的 探讨白术挥发油对小鼠H22肝癌淋巴道转移的抑制作用及相关机理.方法 ELISA法检测小鼠H22肝癌淋巴道转移模型血清中MMP-9的表达.结果 白术挥发油各剂量组对小鼠H22肝癌淋巴道转移模型的肺转移率有明显抑制作用;白术挥发油能显著降低H22肝癌淋巴道转移模型小鼠血清中MMP-9的含量.结论 白术挥发油可能通过抑制MMP-9的分泌起到抗肿瘤侵袭转移的作用.
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白术挥发油对小鼠S180的抑瘤作用及瘤组织凋亡相关基因bcl-2表达的影响
目的 探讨白术挥发油对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达的影响;方法荧光免疫组织化学法,通过激光共聚焦显微镜观察并计数表达bcl-2基因的瘤细胞数.结果 白术挥发油各剂量组对小鼠S180肉瘤组织具有抑制作用;白术挥发油各剂量组能明显降低小鼠S180肉瘤凋亡相关基因bcl-2的表达.结论 白术挥发油可能通过调控肿瘤细胞凋亡相关基因bcl-2的表达而实现抑瘤作用.
