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AMPA谷氨酸受体亚基-2在大鼠脊髓损伤急性期少突胶质前体细胞凋亡的影响
目的:探讨AMPA谷氨酸受体亚基-2 (AMPA-GluR2)在大鼠脊髓损伤急性期对少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)凋亡的影响.方法:60只SD雌性大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=15),脊髓损伤组(SCI组,n=15),AMPA受体拮抗剂NBQX组(n=15)和Ca2+通透性AMPA受体拮抗剂JSTx组(n=15).SCI组、NBQX组和JSTx组应用Allen's打击法建立大鼠脊髓(T9)损伤模型.采用BBB评分评估各组大鼠脊髓损伤后运动功能恢复情况.HE染色观察脊髓损伤后病理学改变.免疫组化和免疫蛋白印迹(Westernblot)法检测AMPA-GluR2在各组大鼠脊髓组织中的表达情况.免疫荧光标记OPCs并应用TUNEL法检测其在各组中的凋亡情况.结果:SCI组BBB评分较假手术组降低(P＜0.05),脊髓损伤后3d NBQX组(3.60±0.65)和JSTx组(3.80±0.76)BBB评分较SCI组(1.50±0.35)高(P＜0.05),NBQX组和JSTx组之间无差异(P＞0.05).HE染色结果显示SCI组和两个拮抗剂组的脊髓组织均存在损伤,脊髓组织腹侧和腹外侧白质病理学损伤评分显示NBQX组(1.60±0.42)与JSTx组(1.50±0.35)评分较SCI组(2.30±0.20)低(P＜0.05).AMPA-GluR2免疫组化结果显示,脊髓损伤后3d SCI组阳性细胞数(6.15±0.52)较假手术组(13.25±0.21)明显减少(P＜0.05),NBQX组(2.10±0.42)和JSTx组(4.45±0.54)阳性细胞数较SCI组少(P＜0.05),NBQX组阳性细胞数少,与JSTx组比较有显著性差异(P＜0.05).Western blot结果显示,脊髓损伤后3d SCI组和两个拮抗剂组AMPA-GluR2表达水平均较假手术组(0.94±0.07)降低(P＜0.05),NBQX组(0.37±0.07)及JSTx组(0.54±0.12)较SCI组(0.69±0.03)低(P＜0.05),且NBQX组AMPA-GluR2表达水平低(P＜0.05).免疫荧光显示,脊髓损伤后3d各组大鼠脊髓组织均存在免疫荧光标记的OPCs;TUNEL法检测OPCs凋亡指数表明,NBQX组(0.21±0.02)和JSTx组(0.17±0.01)较SCI组(0.42±0.02)均降低(P＜0.05),且JSTx组较NBQX组降低(P＜0.05).结论:大鼠脊髓损伤急性期OPCs凋亡与脊髓组织中AMPA-GluR2表达下降有关.
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NBQX对头部照射大鼠大脑皮质少突胶质前体细胞的保护作用
目的探讨大鼠头部照射后早期大脑皮质少突胶质前体细胞的放射性反应及MK801和NBQX对其保护作用.方法SD大鼠10 Gy单次头部照射后即分别向其脑皮质立体定向注射5mmol/L的MK801和50 mmol/L的NBQX各1 μl,然后用免疫荧光组织化学法分别检测各时间点大脑皮质NG2和04阳性细胞数量.结果和对照组相比,照射组大鼠照射后7 d时大脑皮质NG2和O4阳性细胞数显著增加(P＜0.05);MK801组大鼠照射后各时间点大脑皮质NG2和O4阳性细胞数与照射组大鼠比较差异无统计学意义(P＞0.05);而NBQX组大鼠照射后1和7 d时的大脑皮质NG2和O4阳性细胞数明显多于照射组大鼠(P＜0.05).结论大鼠头部照射后早期大脑皮质少突胶质前体细胞反应性增多,并有时程性变化;NBQX对少突胶质前体细胞早期的放射性损伤有一定的保护作用.
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NBQX对脑缺血再灌注后成年大鼠大脑少突胶质前体细胞的保护作用
目的 探讨脑缺血再灌注后成年大鼠大脑少突胶质前体细胞的变化及MK-801和NBQX对其保护作用.方法 以线栓法制作成年SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(阻塞90min再灌注1d、7d和14d),分别向其大脑皮质缺血区立体定向注射5mmol/L 的MK-801和50 mmol/L的NBQX各1μl,用免疫荧光组织化学法检测脑缺血再灌注后成年大鼠早期大脑梗死中心区、梗死周边区和缺血对侧NG2和O4阳性细胞数量.结果 脑缺血再灌注后成年大鼠大脑皮质梗死中心区NG2 和O4阳性细胞逐渐减少, NBQX组大鼠NG2和O4阳性细胞数减少的幅度较少.脑缺血再灌注后梗死周边区NG2和O4阳性细胞数逐渐增加,NBQX组大鼠增加更明显,而MK-801组与生理盐水组无明显差别.结论 成年SD大鼠脑缺血再灌注后梗死周边区少突胶质前体细胞增多.NBQX对少突胶质前体细胞早期的缺血性损伤有保护作用.
