首页 > 文献资料
-
5-AzaC对表皮干细胞Oct4基因的诱导作用研究
目的:探讨并建立表皮干细胞Oct4基因的非转基因诱导方法.方法:分离培养人表皮干细胞,在培养至3～5 d出现克隆性生长时加入工作浓度为10 μmol/L的5-AzaC,24 h后再诱导1次.采用RT-PCR方法,检测经5-AzaC刺激48 h后的表皮干细胞Oct4基因转录水平.结果:PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳后,出现247 bp(Oct4)和219 bp(β-actin)目的片段明亮的特异性条带.结论:5-AzaC能有效激发出表皮干细胞Oct4基因的转录.
-
5-氮胞苷对HSG细胞的诱导凋亡作用
目的 体外研究5-氮胞苷(5-azacytidine,5-azaC)对起源于人颌下腺闰管的HSG(human salivary gland,HSG)细胞的诱导凋亡作用,为应用5azaC对涎腺肿瘤进行治疗奠定理论和实验基础.方法 用不同浓度的5-azaC处理HSG细胞,观察5-azaC在非毒性浓度下,能否诱导HSG细胞发生凋亡.结果 加入5-azaC后48h,光镜下可见到少数细胞体积缩小,胞浆向外突起,类似出芽及发泡状;琼脂糖凝胶电泳结果显示经5-azaC作用72h的基因组DNA呈现出"梯状"图像,基因组DNA被内切酶切成了180bp～200bp及其整倍数的片断;流式细胞仪检测结果显示细胞在G1期前面出现亚二倍体峰;透射电镜结果显示5-azaC处理组细胞可见核内凋亡小体;免疫组化结果显示5-azaC可以抑制P53、Bcl-2和FAP-1的表达;Western blot结果显示5-azaC处理后可使FAP-1的表达降低.结论 5-azaC在体外能诱导HSG细胞凋亡.
-
5-azaC对HSG细胞增殖抑制的实验研究
目的:研究5-azaC对HSG细胞的作用,为5-azaC治疗涎腺肿瘤提供理论和实验基础.方法:通过体外生长曲线测定和体内移植实验检测5-azaC对HSG细胞的增殖抑制作用.结果:体外实验表明5-azaC可以抑制HSG细胞的增殖,5×10-6 mol/L和10×10-6 mol/L 5-azaC 对HSG细胞的增殖抑制率分别为85%和92%.与对照组相比,用5-azaC处理HSG细胞后再移植到裸鼠皮下,其致瘤性降低.结论:体内、体外实验表明5-azaC能抑制HSG细胞的增殖.
