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RPL31-siRNA对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用
目的:研究siRNA沉默糖体蛋白L31 (ribosomal protein L31,RPL31)对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,探讨RPL31基因在胰腺癌中可能的作用机制.方法:设计合成靶向人PL31基因的siRNA及阴性对照siRNA;建立人胰腺癌BxPC-3细胞的Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,按照移植瘤体积随机化分为3组:溶剂对照组、阴性对照组及PL31-siRNA干预组;使用RNAi-Mate转染试剂将RPL 31-siRNA进行移植瘤瘤内注射,观察各组裸鼠体内瘤体生长速度,绘制肿瘤生长曲线；采用实时定量PCR及Western blot的方法检测移植瘤组织RPL31基因的表达;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测裸鼠皮下移植瘤Ki-67及CD31的表达;原位末端标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果:与溶剂对照组和阴性对照组相比,RPL31-siRNA注射组裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,移植瘤体积明显缩小,差异具有统计学意义(P＜0.05)；移植瘤组织中RPL31基因的mRNA水平和蛋白水平表达下调；另外,RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤中Ki-67表达下调(55.78％±4.63％、51.37％±5.05％ vs 11.08％±1.31％),CD31的表达下调(56.53％±6.03％、44.84％±5.24％ vs 9.67％±1.39％); RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤细胞凋亡增加(2.92％±0.54％、3.85％±0.87％ vs 39.58％±4.02％).结论:RPL31-siRNA可以下调胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤中RPL31基因的表达,抑制移植瘤的生长,并且还可以抑制移植瘤中Ki-677及CD31的表达,诱导移植瘤细胞的凋亡.以RPL31为靶点的基因治疗有潜在临床应用前景.
