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红景天甙对肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响
目的:研究红景天甙对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响.方法:SD大鼠90只分为3组:正常对照组(C组)、模型组(M组)和红景天甙干预组(T组).以CCl4sc诱导肝纤维化,T组在造模同时给予红景天甙溶液ip.HE和Masson染色观察肝脏胶原沉积情况,原位杂交和免疫组化检测肝组织Smad 3,Smad 7和CBP基因表达.结果:T组肝脏组织学积分减少(2.1±0.3 vs 3.6±0.8,P=0.041),胶原平均面积显著减少(138±66 vs 691±189 μm2,P=0.046);肝脏Smad 7蛋白表达阳性率增加[(4.27±0.43)% vs (2.86±0.86)%,P=0.035,P＜0.05];Smad 3mRNA表达阳性率减少(0.18±0.03 vs0.62±0 .23,P=0.026),CBP mRNA表达吸光度值亦明显减少(0.092±0.032 vs 0.235±0.025,P=0.00012).结论:红景天甙能有效抑制Smad 3和CBP基因表达,促进Smad 7表达,从而干扰肝纤维化的形成.
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脂质体介导的CBP基因对肺腺癌SPC-A1细胞生长侵袭的抑制作用
目的:研究外源性CSK结合蛋白(CBP)基因转染对人肺腺癌SPC-A1细胞体外生长的影响.方法:构建CBP基因的真核表达质粒pcDNA3.0-CBP,应用重组质粒pcDNA3.0-CBP和窄载体质粒pcDNA3.0(-),以脂质体转染法转染体外培养的人肺腺癌细胞株SPC-A1,用G418(800 mg/L)筛选出抗性克隆.Western blot检测转染前后CBP蛋白水平的变化,MTT法分析细胞生长抑制作用,Transwell体外侵袭实验和Wound-healing实验观察细胞的侵袭和迁移能力.结果:稳定转染CBP基因的细胞株有外源目的基因的整合和相应蛋白的高表达.MTT检测表明,pcDNA3.0-CBP转染组活细胞数低干未转染组和pcDNA3.0(-)空载体质粒细胞转染组(P<0.01).细胞侵袭、迁移实验表明转染pcDNA3.0-CBP的瘤细胞侵袭与迁移能力均明显下降(P<0.01).结论:外源性CBP基因稳定转染可抑制人肺腺癌SPC-A1细胞增殖、侵袭的恶性表型.
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CBP基因在非小细胞肺癌中的表达及其生物学意义
目的:研究CBP(CSK-binding protein)基因表达下降与人肺癌临床病理生理特征的关系,探讨CBP基因表达与肺癌肿瘤细胞发生、侵袭的相关性.方法:对50例非小细胞肺癌(NSCLC)标本(含癌旁组织)和10例肺良性病变组织应用单克隆抗体、免疫组化SP法检测CBP基因的蛋白表达情况.应用RT-PCR方法检测NSCLC中CBP的mRNA表达水平.结果:肺癌肿瘤组织中CBP基因表达水平显著低于癌旁组织和肺良性病变组织(P＜0.05).肺癌组织中CBP基因表达水平降低与肿瘤分期、淋巴结转移程度存在相关性(P＜0.05),与肺癌组织学类型、细胞分化程度以及患者的性别、年龄无关.结论:CBP基因可能参与了对肺癌肿瘤细胞Src家族成员激酶活性的负反馈调节,其表达下降可能与肺癌的发生、发展过程有关.
