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人骨肉瘤细胞系HOS肿瘤干细胞样细胞亚群的分离与鉴定
目的：探索无血清培养基培养人骨肉瘤细胞系 HOS 细胞，筛选并鉴定人骨肉瘤细胞系HOS中肿瘤干细胞相关亚群。方法通过无血清悬浮培养初步富集骨肉瘤细HOS肿瘤干细胞，观察其形成肿瘤干细胞球过程中的细胞形态，并在有血清培养基中诱导其分化。各种浓度化疗药物顺铂（CDDP）和阿霉素（DXR）分别处理HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞，MTT法检测两种细胞对化疗药敏感性。Real-time PCR检测HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3表达情况。将HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞分别接种于BALB/c裸鼠，观察成瘤情况。结果人骨肉瘤细胞系HOS细胞能够在无血清培养基中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球。HOS悬浮细胞球对于化疗药物的敏感性较HOS贴壁细胞高。Real-time PCR结果显示 HOS 悬浮细胞球较 HOS 贴壁细胞高表达肿瘤干细胞相关基因 ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3。HOS悬浮细胞球体内成瘤能力较HOS贴壁细胞强。结论无血清悬浮培养可以初步富集人骨肉瘤细胞系HOS悬浮细胞球，且这些细胞具有肿瘤干细胞特性。
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弱活力精子AKAP82 mRNA表达及意义
目的:通过测定AKAP82 mRNA在弱精子症患者及健康成年男性精子表达程度的差异,了解AKAP82 mRNA表达是否存在异常,探讨其在弱精子症发病机制中可能的作用.方法:采用计算机辅助精液分析系统检测59例弱精子症患者(实验组)和28例健康成年男性(对照组)精液中精子的运动参数,用低渗肿胀(HOS)实验检测实验组和对照组精子尾部总肿胀率,用RT-PCR方法对两组精子中AKAP82 mRNA进行检测.结果:①低渗肿胀(HOS)试验实验组精子尾部总肿胀率,g型精子率低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义.②实验组中有15例标本在RT-PCR检测中发现有AKAP82 mRNA表达缺失,对照组中发现有2例AKAP82 mRNA表达缺失(P<0.05),统计学分析有差异.③实验组中15例RT-PCR检测AKAP82 mRNA表达缺失标本精子尾部总肿胀率,g型精子率均低于实验组中AKAP82 mRNA表达未缺失标本(P<0.05).结论:部分弱精子症患者精子的AKAP82异常可能是精子活力低下的原因之一,AKAP82 mRNA缺失可能是造成AKAP82异常表达的原因之一.
关键词： 弱活力精子 AKAP82 mRNA RT-PCR HOS
