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IRS/PI3K/Akt/Glut文献资料
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丝氨酸蛋白酶抑制剂对棕榈酸诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及机制
目的 观察脂肪细胞因子丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)是否通过IRS/PI3K/Akt/Glut信号通路改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗.方法 以棕榈酸(PA)培养3T3-L1脂肪细胞构建胰岛素抵抗模型,分为PA组、PA+ 100 ng/ml Vaspin组、PA+200 ng/ml Vaspin组、PA+400 ng/ml Vaspin组及PA+400 ng/ml Vaspin+Wortmannin(PI3K抑制剂)组.运用2-脱氧-H3-D-葡萄糖掺入法及葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法分别检测细胞葡萄糖摄取和消耗量.以RT-PCR和Westem blot检测胰岛素信号通路中、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS-1)、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和Glut-4的mRNA和蛋白表达水平.结果 与PA组相比,随着Vaspin浓度增加,葡萄糖摄取和消耗量逐渐增加(P＜0.05),IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平逐渐上升(P＜0.05),p-IRS-1/IRS-l、p-Akt/Akt比值逐渐增加,同时Glut-4的mRNA和蛋白表达也相应上调(P＜0.05).与400 ng/ml Vaspin干预组相比,PA+400 ng/ml Vaspin+Wortmannin组葡萄糖摄取和消耗量降低,IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平下降(P＜0.05),p-IRS-1/IRS-1、p-Akt/Akt比值下降,且Glut-4的mRNA和蛋白表达下调(P＜0.05).结论 Vaspin通过激活IRS/PI3K/Akt/Glut胰岛素信号通路,改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗.
