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甲型H1N1流感病毒采用不同核酸提取方法的比较研究
目的 研究甲型H1N1流感病毒核酸提取的比较准确和有效的方法.方法 选用2014年12月至2015年12月就诊的甲型H1N1流感患者的咽拭子共40份作为研究对象.对所获得的标本进行10-1～10-4的系列稀释,获得不同浓度的流感病毒标本备检.主要采用三种试剂盒进行实验:一种是Promega公司的Maxwell16全自动核酸提取仪以及该提取仪的配套试剂盒,为A组,一种是QIAGEN公司的Rneasy Mini Kit,为B组,第三种则是国产的H生物公司的RNA提取试剂盒,为C组.对三种方法的核酸提取情况进行比较.结果 对同一份咽拭子的核酸进行提取,A组所提取的总RNA浓度高,B组的总RNA浓度次之,C组的总RNA浓度低.A组在各个稀释浓度的流感病毒提取率均较高,差异均具有统计学意义(P＜0.05);C组和B组随着稀释浓度的增大,流感病毒的提取率逐渐降低,尤其是C组当稀释浓度为10-4时,提取不到流感病毒.结论 全自动核酸提取仪对核酸的提取效果较好,即使在高倍稀释的情况下也能够达到较高的核酸提取率,避免了手工提取的误差,是一种快捷有效的检测方法,值得在临床上推广使用.
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全自动核酸提取仪与手动提取组织DNA的效率比较
近年,随着众多与疾病诊断、预后及治疗相关的分子标志物的出现,以石蜡组织DNA为材料进行分子水平的基因检测及筛查已成为临床诊断及相关研究的常规手段.对于各种基因分析而言,重要的是能够获得足够纯度和数量的DNA[1].DNA提取是分子生物学研究的一项基础技术,其提取的质量好坏及数量的多少直接影响到分子生物学实验的开展[2].目前病理科所使用的DNA大部分为人工提取,使用全自动核酸提取仪提取DNA者占极少数.因此,本实验由两名分子实验室技术员独立完成对全自动核酸提取仪与手动提取核酸进行提取DNA效率的验证比较.
