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人免疫缺陷病毒Ⅱ型文献资料
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HIV-2 gag rFPV与rDNA疫苗的联合免疫研究
目的探讨HIV-2核心蛋白基因gag重组DNA疫苗与重组鸡痘病毒进行联合免疫引起小鼠的免疫应答,为研究HIV-2基因重组疫苗的免疫策略提供实验基础.方法大量制备并纯化HIV-2 gag重组DNA疫苗和重组鸡痘病毒,以肌肉注射的方式免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清HIV-2抗体,流式细胞仪测定CD4+、CD8+T淋巴细胞亚类数量,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾CTL对HIV-2靶细胞的杀伤活性.结果重组DNA疫苗和重组鸡痘病毒单独免疫及二者联合免疫均刺激小鼠产生HIV-2特异性抗体,脾T细胞亚类数量增加,并产生针对HIV-2靶细胞的特异性CTL杀伤活性,但联合免疫组在各项指标上均高于单独免疫组.结论以HIV-2 gag重组DNA疫苗进行基础免疫、以HIV-2 gag重组鸡痘病毒进行加强免疫能诱导小鼠产生更强的特异性细胞和体液免疫应答.
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HIV-2 Gp105基因重组鸡痘病毒的构建及鉴定
目的研制预防HIV-2的重组鸡痘病毒活载体疫苗.方法将HIV-2Gp105基因插入鸡痘病毒转移载体pUTA2复合启动子的下游,构建鸡痘病毒转移载体pUTA2-Gp105.将该重组质粒与鸡痘病毒(FPV)282E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组.通过3次BrdU加压筛选,以PCR、RT-PCR、IFA和Western blot鉴定重组病毒.结果从重组鸡痘病毒的基因组和总RNA中能扩增出大小为653 bp的目的基因;感染重组病毒的CEF细胞与特异性荧光抗体发生阳性反应;表达产物与人HIV-2血清发生阳性反应,目的蛋白相对分子质量约为105 000.结论成功获得1株重组鸡痘病毒,可正确表达HIV-2 Gp105基因.
